As doenças alérgicas têm apresentado um significativo aumento em sua prevalência e morbidade nas últimas décadas. Entre elas a rinite e a asma são as manifestações mais comuns, estando relacionadas com a exposição aos aeroalérgenos, em especial aos ácaros presentes na poeira domiciliar. Os alérgenos podem ser provenientes de diversas fontes, sendo biomoléculas proteicas capazes de interagir com anticorpos da classe IgE, desencadeando manifestações clínicas da alergia. Indivíduos que possuem uma predisposição genética para sintetizar altos níveis de anticorpos IgE quando sensibilizados com pequenas doses de alérgenos são aqueles mais acometidos por doenças alérgicas, sendo denominados de indivíduos atópicos. Os estudos voltados ao tratamento e o diagnóstico dessas doenças são de grande relevância, entretanto, antes de qualquer tratamento é muito importante que o diagnóstico seja firmemente estabelecido. Para isso, os pacientes devem ser cuidadosamente examinados para que os alérgenos sensibilizantes para cada caso possam ser identificados e servir de suporte para os testes de diagnóstico. Os anticorpos monoclonais têm sido utilizados em diagnóstico e tratamento de algumas doenças alérgicas e seus mecanismos de ação atuam como agonistas ou antagonistas de receptores, na neutralização de alvos, como toxinas, citocinas e marcadores de células para posterior destruição destas e o seu uso pode preencher uma necessidade ainda não atendida pelas atuais opções terapêuticas disponíveis.

A regeneração tecidual muito é estudada dentro da comunidade científica e, opções terapêuticas
para tal, minimamente invasivas, ganham destaque, à medida que envolvem para o paciente
procedimentos invasivos intra e pós-operatórios muito mais inferiores comparadas à
procedimentos cirúrgicos de grande extensão. Para esse fim, o composto biológico autólogo
plasma rico em plaquetas (PRP) torna-se um caminho para o objetivo de regenerar uma lesão à
proporção que entrega para o paciente uma concentração suprafisiológica de mediadores
celulares encontrados dentro das plaquetas, atuantes no processo inflamatório, entre eles fatores
de crescimento e citocinas. A composição do bioproduto será influenciada pela saúde basal do
indivíduo a quem está sendo preparado o PRP, consequentemente afetando o desenvolvimento
da terapia. O presente trabalho explora algumas variáveis clínicas que possam vir a afetar a
concentração de plaquetas do bioproduto as analisando através da distribuição Poisson
considerando estudar a relação da variável D e PRL com as variáveis: X1 = grupo (1-presença
da osteoartrite; 0-sem presença da osteoartrite); X2 = sexo (1-masculino; 0-feminino); X3 =
idade (1-menor 60 anos; 0-maior 60 anos); X4 = tabagista (1-sim; 0-não); X5 = consumo de
álcool (1-sim; 0-não); X6 = frequência do consumo de antiinflamatórios não esteróides
(AINEs) (1-diário; 2-eventualmente; 3-não toma); X7 = presença de diabetes autoreferida (1-
sim; 0-não); X8 = presença de hipertensão autoreferida (1-sim; 0-não); X9 = presença de
condições osteoarticular e/ou musculoesquelética (1-sim; 0-não). Com exceção da variável sexo
e frequência de consumo de AINEs de forma eventual, as variáveis apresentaram impacto
significativo na concentração e diferença plaquetária no plasma rico em plaquetas. Portanto, ao
ser determinado a produção do biomaterial, é preciso dar importância e levar em consideração
os aspectos clínicos do estado de saúde do paciente, observando e analisando as variáveis
retratadas, já que esse perfil imunológico do paciente será exposto também no concentrado de
plaquetas produzido e isso interferirá na qualidade terapêutica e no processo de recuperação
almejado.

As microalgas constituem um grupo heterogêneo e diverso de microrganismos fotossintetizantes, que integram o fitoplâncton e podem ser encontrados nos mais variados ecossistemas. Devido à capacidade fisiológica adaptativa do grupo, é considerado uma rica fonte de metabólitos secundários biologicamente ativos. Apesar disso, existem poucos trabalhos publicados acerca do potencial antifúngico das microalgas e muitas espécies ainda não foram contempladas. O objetivo deste estudo foi avaliar o potencial antifúngico das microalgas Ankistrodesmus falcatus, Chaetoceros neogracilis, Desmodesmus brasiliensis, Dunaliella tertiolecta, Kirchneriella lunaris e Tetraselmis gracilis. No primeiro capítulo foi realizada uma revisão narrativa da literatura acerca da atividade antifúngica de extratos e compostos de microalgas frente à dermatófitos. No segundo capítulo, o potencial antifúngico dos extratos etanólicos microalgais foi testado contra os dermatófitos
Nannizzia gypsea, N. nana, Trichophyton mentagrophytes e T. tonsurans. A metodologia utilizada foi a microdiluição em caldo, com intervalo de 0.0115 a 6 mg mL-1. Todos os extratos microalgais apresentaram atividade antifúngica, com destaque para os extratos das microalgas C. neogracilis, D. brasiliensis e K. lunaris,
que inibiram totalmente o crescimento de todas as espécies de dermatófitos avaliadas. Os menores valores de CIM registrados foram para os extratos de D. brasiliensis e K. lunaris, ambos 0.188 mg mL-1, contra T. tonsurans e N. nana. No terceiro capítulo foi realizada uma revisão sistemática da literatura acerca da atividade antifúngica de microalgas frente à fungos fitopatógenos. No quarto capítulo, os extratos etanólicos das microalgas foram testados contra os fungos fitopatogênicos Colletotrichum fructicola, C. gloeosporioides, Fusarium oxysporum e Neoscytalidium dimidiatum. A metodologia utilizada foi a microdiluição em caldo, com intervalo de 0.0115 a 6 mg mL-1. Quatro dos extratos avaliados apresentaram atividade antifúngica (A. falcatus, C. neogracilis, D. brasiliensis e K. lunaris) contra duas espécies de fungos (C. fructicola e C. gloeosporioides). Os menores valores de CIM registrados foram para o extrato de K. lunaris contra C. fructicola (CIM 0.047 mg mL-1) e C. gloeosporioides (CIM 0.75 mg mL-1). Esse foi um trabalho pioneiro acerca da atividade antifúngica destas microalgas. Espera-se que, a partir deste estudo, novas pesquisas poderão ser realizadas direcionadas ao isolamento e identificação destas biomoléculas ativas com propriedade antifúngica. Assim como, no futuro, novos fármacos e biopesticidas possam ser formulados a partir destes extratos e moléculas.

Nesta pesquisa utilizou-se dois microrganismos produtores de levana, Zymomona mobilis e um Bacillus isolado no Laboratório de Biotecnologia e Ecologia de Microrganismos (LABEM) para avaliar a síntese do biopolímero através de um meio sintético rico em sacarose e duas fontes alternativas de carboidratos (palma e garapa). A levana é um exopolissacarídeo (EPS) obtido pela reação de transfrutosilação durante a fermentação de culturas com Zymomonas mobilis quando crescidas em meio rico com sacarose. Esta bactéria tem despertado grande interesse pelos pesquisadores e pelo setor industrial por apresentar altos rendimentos com a produtividade de etanol e na produção de levana, quando utilizado sacarose como fonte de carbono. Diversas pesquisas buscam entender melhor as vias metabólicas da síntese de levana bem como a otimização do processo para a sua produção. Sabe-se que a produção de levana por Zymomonas mobilis é dificultada pela capacidade dessa cepa direcionar seu metabolismo para a produção de bioprodutos como etanol ao invés do biopolímero. Foi testado no meio de cultura duas fontes alternativas de carboidratos (garapa e palma) com concentração de 20% no meio, os experimentos foram realizados em triplicatas no shaker rotativo por 48 h e no biorreator biológico aerado os melhores parâmetros em bateladas de 12 h. Testes experimentais realizados em shaker e biorreator utilizando Z. mobilis e Bacillus, mostraram que a solução de palma e garapa utilizadas em consórcio e palma separadamente foram eficientes na formação da síntese de levana. As análises de espectroscopia de FTIR e RAMAN compararam a levana produzida nessa pesquisa com amostras de levana fornecida pela Sigma e demonstrou que existe alto grau de similaridade entre as produções com a goma padrão.

As mudanças climáticas têm impacto direto na produção agrícola vegetal, tendo em vista que levam a um processo gradual de aumento das condições de estresses abióticos, afetando o e desenvolvimento e produtividade das lavouras. Ricinus communis (mamona) é uma espécie oleaginosa de significativa importância econômica devido ao conteúdo elevado de óleo em suas sementes. Sendo cultivada em regiões tropicais e subtropicais mundo afora. No Brasil, a mamona representa significativa importância socioeconômica visto que é essencialmente cultivada por agricultores familiares na região do semiárido nordestino, onde predominam condições ambientais de seca e solos salinos. Do monto de vista da fisiologia molecular vegetal, os fatores de transcrição atuam na regulação do desenvolvimento, morfogênese em resposta aos estresses ambientais. O fator nuclear-Y (NF-Y) pertence à família dos fatores de transcrição (FT), estando presente em todos os genomas de eucariotos. Trata-se de um complexo proteico formado por três subunidades diferentes HapB (NFYA), HapC (NF-YB) e HapE (NF-YC), sendo cada subunidade codificada para mais de um gene em plantas. As proteínas de NF-YB desempenham papel importante na regulação das respostas das plantas à estresses abióticos. O presente estudo envolveu o gene da subunidade B (RcNF-YB8) de mamona, o qual foi caracterizado funcionalmente em Arabidopsis (Arabidopsis thaliana) mediante estresses induzidos por restrição osmótica mediante embabição e germinação em soluções salinas e de manitol, assim como na presença de ácido abscísico (ABA) exógeno. As linhagens transgênicas de Arabidopsis superexpressando RcNF-YB8 mostraram germinação mais vigorosa do que a linhagem selvagem (Col-0) em soluções de manitol (400 mM e 500 mM), NaCl (200 mM e 250 mM) e ABA (1,0 µM e 2,0 µM). Foi também analisada a atividade antioxidante pela enzima superóxido de dismutase (SOD). Tomados em conjunto, esses resultados sugerem que RcNFYB8 induz tolerância da Arabidopsis à salinidade demosntrando ser marcador molecular e bioquímico potencialmente útil para o melhoramento genético de mamona, visando melhor desempenho sob as condições de restrição hídrica e salinidade, comuns no semiárido nordestino.

O bioetanol é um composto produzido tradicionalmente a partir da fermentação de açúcares fermentáveis. Diferentes substratos podem ser utilizados para este fim. O bioetanol produzido a partir de substratos lignocelulosicos tem-se etanol de segunda e terceira gerações (NÃO ESTÁ CLARA A FRASE). Na produção de deste bioproduto podem ser utilizados microrganismos como Zymomonas mobilis, Clostridium Thermocellum e Saccharomyces cerevisiae. Este último, por sua vez, é o organismo mais utilizado para este fim. A produção de etanol pode ter diferentes aplicações, tais como produção de bebidas, sejam fermentadas e/ou destiladas, ou mesmo na produção de biocombustíveis. Neste sentido, métodos de otimização da produção de bioetanol torna-se relevante. Métodos distintos de estímulos vem sendo testados a fim de alcançar este objetivo, tal como a aplicação de luz. Deste modo, o objetivo do presente trabalho foi avaliar o efeito da aplicação de correntes elétricas em microamperagens sobre Saccharomyces cerevisiae durante a fermentação alcoólica. Para tanto, biorreatores capazes de aplicar correntes elétricas no meio de cultura contendo leveduras. As correntes utilizadas foram de 1Hz e 50Hz, sendo as intensidades de 250µA, 500µA, 750µA e 990µA, assim foram testados 8 grupos experimentais e um grupo controle onde não havia aplicação de correntes elétricas. As correntes elétricas com a modulação de 1Hz apresentaram uma redução na produção de etanol proporcional ao aumento de da amperagem. Entretanto, na frequência de 50Hz foi observado um efeito oposto. Nesta modulação a intensidade de 990µA apresentou a maior diferença em relação ao grupo controle. Esta diferença foi estatisticamente significante em relação ao controle. Em seguida, esta corrente de 50Hz e 990µA foi selecionada e testada em biorreatores de 20L e mesmo neste caso a significância foi mantida. Portanto, concluiu-se com este trabalho que o uso de correntes elétricas pode aumentar a produção de bioetanol.

As terapias biomoduladoras têm sido utilizadas com a finalidade de melhorar o padrão cicatricial e auxiliar no processo de reparo tecidual. O jato de plasma é um recurso eletroterapêutico que atualmente vêm sendo bastante indicado para uso dermatológico e fins estéticos com o objetivo de tratar rugas e linhas de expressão, estrias e cicatriz de acne. Adicionalmente, estudos tem comprovado a sua ação bactericida, fato este que pode ampliar o seu uso para outras finalidades terapêuticas. Objetivo: Avaliar os efeitos do jato de plasma no reparo de feridas cirúrgicas padronizadas em pele de ratos através de imagem termográfica infravermelha e análise histopatológica. Metodologia: Foi utilizado um total de 20 animais, subdivididos em dois grupos, o grupo controle (GC) e o grupo tratado com o jato de plasma (GJP). Foi realizada uma ferida cirúrgica cutânea, padronizada, no dorso dos animais e procedeu-se o registro termográfico em diferentes períodos. O grupo controle não sofreu nenhum tipo de terapia, ao passo que no GJP foi realizada terapia com jato de plasma (modo condução, corrente contínua, intensidade de 5/8 e tempo de 90 segundos), imediatamente após a cirurgia, e nos dois dias seguintes. Metade dos animais de cada grupo foram sacrificados no 5° dia após o procedimento cirúrgico, e o restante no 10° dia. Foi removido uma amostra do tecido de cada um dos animais, para processamento e análise histológica. Foi realizada análise estatística. Resultado: Constatou-se que o maior Delta T aconteceu no grupo tratado com jato de plasma, em especial no 5o dia (p>0,05). Conclusão: O presente estudo constatou-se que a termografia infravermelha demonstrou ser um eficiente recurso para captação das variações de temperatura na pele de ratos durante o reparo cutâneo. A análise dos termogramas permitiu comprovar que a aplicação do jato de plasma nas feridas cirúrgicas, gerou uma variação térmica significativa em relação aos espécimes do grupo controle, em especial no 5° dia do período de cicatrização.

As microalgas têm potencial para produção de uma diversidade de ativos de interesse industrial seja na indústria alimentícia por seu teor alto de proteínas e carboidratos contidos na biomassa; seja no tratamento de efluentes agroindustriais como o POME (Palm oil mil effluent) ou voltada para a indústria de ativos com alto valor agregado, como os pigmentos carotenoides, aplicados na área de cosméticos, de nutrição animal e também alimentação humana. Dentre as espécies com este potencial, destacam-se duas cepas isoladas de ambientes brasileiros, a dulcícola Chlamydomonas biconvexa Embrapa|LBA40 e a espécie halotolerante Dunaliella viridis Embrapa|LBAS001. No presente estudo, o primeiro capítulo mostrou que a cepa C. biconvexa Embrapa|LBA40, isolada e cultivada em efluente da indústria de óleo de palma (POME) foi capaz de alcançar a produtividade de biomassa de 190,60 mgDW • L-1 • d-1 em fotobiorretores airlift de placa plana de 15L. A espécie foi capaz de reduzir a amônia e o nitrito do resíduo de POME em 99% assim como também reduziu o fosfato em 98% após 5 dias de cultivo. Além disso, o genoma mitocondrial foi obtido através de sequenciamento genético, revelando um mtDNA de 15,98 Kb, com 14 genes, dos quais 9 são genes codificadores de proteínas. Análises filogenéticas por meio do gene COX1 confirmaram a identificação taxonômica como C. biconvexa, abrindo oportunidade para futuros estudos genéticos de modificação e melhoramento da espécie. Já a cepa carotenogênica e halotolerante D. viridis Embrapa|LBAS001, capaz de crescer em meio com até oito vezes a salinidade do mar (3,5% NaCl), foi sequenciada utilizando as plataformas Illumina e Nanopore. Os genomas mitocondrial, cloroplastidial e nuclear foram montados e anotados. A identificação ao nível de espécie foi confirmada por análise filogenética. Os resultados revelaram genomas mitocondrial, cloroplastidial completos e draft nuclear de 46 Kb, 176 Kb e 167 Mb, respectivamente. As organelas apresentaram introns em suas sequências, característica típica de espécies do gênero de Dunaliella. O draft do genoma nuclear apresentou conteúdo de genes que codificam para enzimas e produtos com potencial aplicação industrial variável. Além disso, a rota metabólica de produção de carotenoides anotada sugere potencial possibilidade de aplicação da cepa em projetos de biorrefinarias para a produção de ativos como α-caroteno, β-caroteno, luteína, fitoeno e outros metabolitos de alto valor. Assim, o presente genoma poderá ser utilizado para estudos futuros de aumento da expressão de genes de interesse e fornecer subsídios para protocolos de transformação genética.

O desenvolvimento da biotecnologia moderna demanda quantidades satisfatórias de proteínas recombinantes solúveis e biologicamente ativas, tendo em vista a crescente utilização de proteínas heterólogas em laboratórios de pesquisa e aplicações terapêuticas. Portanto, a seleção de um sistema de expressão ideal, incluindo os elementos genéticos e o hospedeiro para expressão, é uma questão importante no desenvolvimento de proteínas recombinantes. Recentemente, foi desvendada a influência significativa que os elementos genéticos exercem na produção de uma proteína recombinante, sendo possível a otimização desses elementos graças aos avanços no campo da biologia sintética. Estudos de dados da literatura realizados pelo nosso grupo de pesquisa permitiram a montagem de uma nova Unidade Operacional de Expressão (UOE) composta por partes biológicas padronizadas e bem caracterizadas para melhorar a expressão de proteínas recombinantes em hospedeiros bacterianos. Também construímos uma nova variante do promotor T7 com atividade transcricional aumentada (1,7 vezes maior) em comparação com o promotor T7 tipo-selvagem. Essa nova UOE gerou uma produção melhorada da proteína repórter superfolderGFP (sfGFP) em E. coli BL21(DE3) (unidades de fluorescência relativa/RFU = 70,62 ± 1,62 A U.) quando comparada a um vetor de expressão utilizado como controle (plasmídeo BBa_I746909; RFU = 59,68 ± 1,82 A U.). A funcionalidade dessa UOE também foi avaliada com a produção do alérgeno recombinante Der p 21 wt e suas variantes mutantes hipoalergênicas. O alérgeno Der p 21 é considerado um alérgeno importante, com alta capacidade de ligação a anticorpos IgE e alta atividade alergênica. Isso define essa proteína como potencial candidata à imunoterapia alérgeno-específica (AIT) contra alergia desencadeada por D. pteronyssinus. Sendo assim, variantes hipoalergênicas do alérgeno Der p 21 foram construídas para compor formulações de vacinas para AIT, seguindo uma abordagem de bioinformática estrutural e imunoinformática.Duas dessas variantes mutantes (K110G e E87S) apresentaram baixa capacidade de ligação a IgE em comparação com o alérgeno rDer p 21. Logo, essas novas proteínas hipoalergênicas são candidatas promissoras para compor formulações de imunoterapia alérgeno-específica de próxima geração em um futuro próximo. Além disso, o uso de vetores de expressão otimizados, como o montado neste estudo, oferece excelentes vantagens na produção de proteínas recombinantes de interesse biotecnológico, permitindo uma produção eficiente com melhor rendimento e qualidade.

As microalgas são organismos microscópicos, procarióticos ou eucarióticos, unicelulares e fotossintetizantes encontrados em ambientes marinhos, dulciaquícolas e terrestres. Seu rápido crescimento, diversidade de metabólitos, capacidade de adaptação a condições adversas e composição com grandes quantidades de proteínas, carboidratos, pigmentos, lipídios e outras biomoléculas são responsáveis por sua grande importância biotecnológica. Uma das alternativas para a redução dos custos de produção de biomassa de microalgas é a reutilização do meio de cultivo, que consiste na separação da biomassa microalgal e consequente inoculação do meio residual, que pode ser suplementado ou não com nutrientes. Depois de cultivada, a biomassa produzida precisa ser separada do meio de cultivo para que seja utilizada nos diferentes processos industriais. Estima-se que o custo de separação pode atingir 20–30% do seu custo total de produção. A eletrofloculação é um método de separação de biomassa ecologicamente correto, barato e energeticamente eficiente e consiste no uso de dois eletrodos metálicos (um ânodo e um cátodo) que liberam íons que neutralizam a carga das células microalgais e permite a formação de flocos celulares, resultado na separação da biomassa. Desse modo, o desenvolvimento de tecnologias de produção e separação da biomassa microalgal que permitam a redução dos custos, sem comprometer a eficiência e qualidade do processo é de grande importância para o estabelecimento das biomoléculas obtidas de microalgas no mercado mundial. Diante disso, este trabalho tem como objetivo a verificação do efeito do reaproveitamento de meio durante o cultivo de microalgas marinhas e dulciaquícolas, bem como o teste da eletrofloculação como método para separação da biomassa de microalgas marinhas. Para isso, as microalgas Dunaliella salina e Ankistrodesmus falcatus foram cultivadas em fotobiorreator tipo Erlenmeyer (1 L) em meio Conway e LC-Oligo, respectivamente. D. salina foi submetida a 3 diferentes condições de cultivo: meio padrão, meio suplementado com nitrogênio e meio suplementado com fósforo. Ao final de cada ciclo, o meio residual foi reutilizado, recebendo novo inóculo de D. salina. Foram analisados os parâmetros de produção máxima, taxa de crescimento máximo e produtividade máxima. Houve redução na produção de biomassa, crescimento e produtividade máximos durante cultivo no meio Não suplementado e suplementado com Fósforo após 3 ciclos. No meio suplementado com Nitrogênio houve aumento significativo da produção de biomassa nos meios reutilizados em comparação ao cultivo Controle. A maior produção de biomassa foi obtida no 1º ciclo em meio reutilizado (1,122 g L-1). O 4º ciclo de cultivo promoveu maior produção de biomassa que o 3º ciclo (0,908 g L-1 e 0,854 g L-1, respectivamente). A produtividade máxima aumentou significativamente durante os ciclos de cultivo em meio reutilizado, sendo a maior produtividade obtida no 4º ciclo (0,201 g L-1 d-1). Foi observada morte celular durante cultivo de A. falcatus em meio reutilizado. Além disso, foi desenvolvido um aparelho de eletrofloculação para fotobiorreator tubular composto por dois eletrodos paralelos de alumínio e fonte elétrica com ajuste de tensão (12V–24V) para separação de biomassa de microalgas, que resultou no depósito de uma patente de modelo de utilizada junto ao Instituto Nacional de Propriedade Industrial.

A aroeira-vermelha (Schinus terebinthifolius) tem sido estudada principalmente pelas suas propriedades condimentares e medicinais, além de sua importância na recuperação de áreas degradadas e recomposição da vegetação nativa. Por isso, devido a importância de se obter sementes de boa qualidade dessa espécie para uso em programas de reflorestamento e plantios comerciais, objetivou-se nesse estudo avaliar os perfis bioquímico e fisiológico da maturação, armazenamento e germinação de sementes sob condições de restrição hídrica e após osmocondicionamento. Observou-se que, as sementes obtidas de frutos no estádio Vermelho apresentaram melhor qualidade fisiológica e que, as sementes recém-colhidas apresentaram melhor desempenho germinativo comparado com as que passaram pela secagem. As sementes armazenadas em ambiente refrigerado (5ºC) foram capazes de manter a sua qualidade fisiológica por 15 meses, diferente das armazenadas em temperatura ambiente (24ºC), que permaneceram viáveis, porém, reduziram a germinabilidade e o vigor. As mudanças nas atividades das enzimas superóxido dismutase (SOD), catalase (CAT) e ascorbato peroxidase (APX) nessas condições de armazenamento indicam que o sistema antioxidante enzimático está relacionado com a manutenção da viabilidade das sementes, porém, não foram capazes de evitar a perda da qualidade, o aumento da peroxidação lipídica, constatado através da quantificação de malondialdeído (MDA), e da permeabilidade de membranas, através do teste de condutividade elétrica (CE), quando armazenadas em temperatura ambiente. Nos ensaios de restrição hídrica, observou-se que a espécie é altamente susceptível a esse estresse abiótico no processo de germinação e estabelecimento inicial de plântulas. As avalições bioquímicas mostraram que as atividades das enzimas SOD, CAT e APX durante a embebição controlada aumentaram quando submetidas a baixos níveis de estresse (-0,2 MPa), porém, foram reduzidas em níveis severos de restrição hídrica (-0,8 MPa). Já em plântulas, os primeiros danos oxidativos ocorreram nas raízes, comprovados pela redução da atividade da SOD, CAT e APX em -0,2 MPa. Além disso, quando utilizado a embebição controlada para efeito de osmocondicionamento ou priming, observou-se que o uso de potenciais menores que -0,2 MPa por 168 h não promoveu melhoria na germinação e vigor das sementes de S. terebinthifolius, no entanto, potenciais de -0,2 e -0,4 MPa foram capazes de promover uma germinação mais rápida e uniforme, indicando que o uso desse tratamento pré-germinativo pode contribuir para melhorar o potencial fisiológico de sementes dessa espécie.

A mamona (Ricinus communis L.) é uma espécie oleaginosa reconhecida globalmente pelas inúmeras aplicações industriais e elevado valor de mercado global do óleo extraído de suas sementes. Além disso, tem significativa importância socioeconômica no que se refere à sua produção ser tradicional e majoritariamente realizada no Brasil por agricultores familiares na região do semiárido nordestino brasileiro onde predominam os cultivos rudimentares sob condições adversas típicas da região. O objetivo da presente pesquisa foi a caracterização e superexpressão de genes de mamona associados a melhor tolerância a estresses abióticos durante a germinação e desenvolvimento inicial de plântulas. Foram analisadas três famílias de genes relacionadas às proteínas superóxido dismutase (SOD); proteínas de choque térmico (small heat shock proteins – sHSP), e do fator de transcrição nuclear Y subunidade B (NF-YB), conforme a importância dos referidos genes na literatura, e da seleção por análise prévia dos genes induzidos em microarray de genes expressos mamona sob estresse térmico. A identificação e caracterização dessas famílias em mamona foi comparada com genomas de angiospermas, obtendo o perfil de expressão gênica em condições de estresses abióticos durante a embebição, protrusão radicular (germinação per se) e pós-germinação (plântulas jovens), e caracterização funcional dos genes alvo quanto a tolerância a estresses abióticos através da superexpressão em Arabidopsis thaliana. No CAPÍTULO 1 (artigo publicado), identificamos a família de genes da SOD em mamona (RcSOD), e os genes ortólogos em angiospermas, mostrando o perfil de expressão dos genes de RcSOD em embriões durante a embebição e germinação sob diferentes potenciais osmóticos (restrição hídrica). Os genes RcCuZnSOD1 e RcFeSOD8 demonstraram serem induzidos durante a embebição pelo estresse osmótico indutor de priming de sementes de mamona, estando associados às respostas benéficas ao vigor de sementes e plântulas em diferentes genótipos de mamona. No CAPÍTULO 2 (artigo a ser submetido), identificamos possíveis elementos regulatórios de genes de RcSOD sob estresses abióticos e regulação por ABA, e o mecanismo de regulação pelo microRNA 398 para os genes RcCCuSOD4 e RcCuZnSOD3. Identificamos os genes RcCuZnSOD1 e RcFeSOD8 como responsivos ao estresse térmico (35 °C) durante a embebição e germinação. Além disso, identificamos que outros genes RcSOD (RcCCuSOD4, RcFeSOD7, RcCuZnSOD3) foram induzidos em sementes sob o estresse térmico durante a protrusão radicular e em plântulas com radículas de 2 cm. Foi possível observar a localização subcelular dos genes de RcSOD em folhas de Nicotiana benthamiana, em que genes da RcSOD (RcMnSOD5 e RcFeSOD8) podem ter diferenças comparado a localização subcelular em A. thaliana. No CAPÍTULO 3 (artigo publicado), identificamos inicialmente 41 genes da família de proteínas de choque térmico preditos em mamona (RcsHSP), mostrando que a duplicação em tandem parece ser uma das possíveis causas para o maior número de genes em mamona comparado a A. thaliana. Ademais, mostramos o padrão de expressão gênica de 10 genes RcsHSP induzidos durante a protrusão radicular e estágio inicial de plântulas. Porém, demonstrando especificidade de expressão em raízes, cotilédones e folhas em diferentes estádios de desenvolvimento de plântulas sob estresse térmico. Por fim, fizemos a caracterização funcional por meio da superexpressão de dois genes RcsHSP (RcsHSP12 e RcsHSP19) em A. thaliana, resultando em maior porcentagem de germinação das sementes sob estresses térmico, osmótico e salino; maior potencial antioxidante enzimático de SOD; e maior concentração de carboidratos protetores (sacarose e rafinose). No CAPÍTULO 4 (artigo submetido), identificamos a família de genes do fator de transcrição nuclear NF-YB em mamona, e fizemos a caracterização funcional do gene RcNF-YB8 quanto a indução do florescimento precoce em A. thaliana. A comparação filogenética nos permitiu identificar genes ortólogos em angiospermas e os padrões de motifs que possam estar associados a diferenças entre as subfamílias dos RcNF-YB. A indução dos genes de RcNF-YB foi observada como sendo maior durante a embebição e germinação comparado à fase pós-germinativa, também apresentando perfis diferentes de indução e supressão por estresse térmico. O gene RcNF-YB8 demonstrou supressão por estresse térmico e um padrão de maior expressão em folhas, sendo que a superexpressão em A. thaliana demonstrou também induzir o florescimento precoce, impactando no tamanho da planta e frutos, e consequente produtividade. Os resultados envolvem ampla caracterização de genes de três famílias importantes na resposta de sementes e mudas (plântulas) a estresses abióticos e subsequente desenvolvimento da planta, em que a caracterização dos genes mostrou significativa relevância, indicando genes-alvos potencialmente úteis em programas de melhoramento genético visando variedades superiores de mamoneira, que possam ter melhor vigor e sucesso na implantação e desenvolvimento da lavoura, e consequente produtividade de sementes de mamona pelos agricultores familiares no semiárido nordestino brasileiro.

A Linfadenite Caseosa (LC), doença infecciosa causada pela bactéria Gram positiva Corynebacterium pseudotuberculosis em caprinos e ovinos, é altamente prevalente em rebanhos de pequenos ruminantes mundialmente. Diversos prejuízos econômicos, representados pela diminuição do valor do couro, condenação de carcaças e falhas reprodutivas, já foram associados com a ocorrência da doença. As técnicas atualmente disponíveis de diagnóstico clínico e laboratorial da doença carecem de disponibilidade mercadológica ou de sensibilidade e, com isso, animais infectados podem permanecer no rebanho servindo de fonte de infecção para os outros animais. A Ressonância Magnética Nuclear (RMN) e a quimiometria são técnicas que podem identificar metabólitos não detectáveis por técnicas clássicas de diagnóstico laboratorial. O presente estudo teve como objetivo determinar marcadores da infecção por C. pseudotuberculosis em caprinos utilizando métodos clássicos (parâmetros clínicos, hematológicos, bioquímicos), sorológicos, RMN e quimiometria. Foi utilizado um rebanho de 173 caprinos da raça Canindé, dos quais foram coletadas as amostras de sangue e soro para as análises. Os animais foram classificados como não infectados controle (C), assintomáticos (A) e sintomáticos (S), de acordo com o isolamento microbiológico, a partir do conteúdo de lesões caseosas e ensaio sorológico (ELISA). Foram realizados hemogramas completos, ensaios de bioquímica clínica para determinação da concentração de compostos séricos; análises de 1H RMN por NOESY (Nuclear Overhauser Effect SpectrosopY) e CPMG (Carr-Purcell Meiboom-Gill) e quimiometria por Análise Discriminante por Quadrados Mínimos Parciais (PLS-DA) para verificação e possíveis biomarcadores para a doença. Foi observada alta disseminação de infecção por C. pseudotuberculosis nesse rebanho, com 86,13% de animais positivos, sendo desses 74,57% assintomáticos e 11,56% sintomáticos. Nas análises de hemograma e leucograma, houve diferença estatística no nível de ureia sérica no grupo de assintomáticos maior do que animais não infectados. Na avaliação de 62 amostras de soro por RMN e quimiometria, as técnicas empregadas foram satisfatórias na discriminação dos grupos de animais, sendo também complementares e confirmatórias entre si, demonstrando possíveis biomarcadores para LC. Foram identificados 20 metabólitos de interesse pela técnica de NOESY e 29 por CPMG, abrindo-se possibilidades promissoras para estabelecimento das técnicas de RMN e quimiometria como adequadas para método diagnóstico da doença, tanto pelas vantagens das técnicas quanto pelos resultados aqui reportados pela primeira vez em caprinos.

Esse trabalho tem por meta inovar no desenvolvimento de estratégias biotecnológicas a partir do cultivo de microrganismos e mitigar os principais desafios da indústria de petróleo e gás. O petróleo é um commodity de alta demanda global. Com o desenvolvimento econômico dos países existe a necessidade de aumentar a sua produção e responder rapidamente aos desafios enfrentados pelo setor. A biotecnologia pode oferecer o aporte tecnológico em bioprocessos que atendam a essas adversidades. Atualmente os maiores ônus se concentram nos processos de aumento de recuperação do óleo, destinação da água produzida e controle do souring. Além disso, durante os protocolos operacionais podem ocorrer acidentes de derramamento, portanto, é importante estabelecer estratégias para áreas impactadas. Dessa forma, os microrganismos podem ser aplicados de forma ampla e efetiva em diferentes cenários e sua diversidade metabólica permite a produção de bioativos. No presente estudo cepas foram isoladas para a produção de biossurfactantes que melhorem a recuperação do óleo em poços maduros, além de serem aplicados na biorremediação de ambientes afetados. O processo se torna mais atrativo com a produção dessas moléculas na água produzida com alto teor de sais e sem tratamentos adicionais. Na própria água produzida foram isoladas Bactérias Redutoras de Sulfato (BRS) usadas em uma nova estratégia de monitoramento rápido. Portanto, o objetivo desse estudo é gerar soluções ambientalmente sustentáveis e economicamente competitivas a partir do cultivo de microrganismos de forma a reduzir os custos e minimizar os impactos no ambiente.  

A parestesia orofacial é um distúrbio neurossensitivo que pode afetar diariamente a qualidade de vida dos indivíduos submetidos a alguns procedimentos odontológicos ou a trauma facial. Uma opção de tratamento mais tecnológica e inovadora para essa condição é a fototerapia com laser, que pode ser empregada no serviço público de saúde, e assim atender os princípios da bioética e justiça, disponibilizando com equidade, igualmente à toda sociedade. O objetivo desse estudo transversal foi avaliar a efetividade da fototerapia laser no tratamento parestesias orofaciais. Através de um banco de dados, foram selecionados 296 ciclos de laserterapia, de 101 pacientes. Nele continha informações do sexo, idade, história médica e odontológica dos pacientes tratados no período de 2003 a 2018, na Clínica de Laser do Centro de Biofotônica da FOUFBA. Foi utilizado lasers diodo infravermelho (700-808nm), no modo contínuo de emissão, com protocolo de aplicação individualizado, sendo realizado a cada 48 horas, totalizando 12 sessões. A Escala Visual Analógica foi utilizada para avaliação da sensibilidade nervosa, a cada sessão. Os registros dessa escala foram avaliados juntamente com os demais dados do banco e analisados estatisticamente. Os resultados apontaram que aproximadamente 62% dos ciclos tiveram desfechos satisfatórios (melhora e assintomático), sendo que 80% foram mulheres e 20% homens (p=0,02); 55,68% foram de pacientes com 19 a 42 anos e 44,32% tinham 43 a 89 anos de idades (p=0,04). Sobre a história médica, 51,35% dos que tinham alguma comorbidade e 48,65% não tinham (p>0,05); 25,41% dos que faziam uso da vitamina B e 74,59% dos que não utilizavam esse suplemento associado, obtiveram resultados satisfatórios após os ciclos de laserterapia (p>0,05). A dose cíclica (DC) média utilizada foi de 280,5 ± 11,0J/cm² sendo que a DC média que obteve resultado satisfatório foi de 293,6J/cm² ± 201,2J/cm². Houve significância estatística entre a DC média em algumas variáveis como: tipo de nervo lesionado, sendo o lingual, com DC mais altas; Se a parestesia foi em nervo isolado ou em mais de um nervo, sendo esse último com DC mais alta, a causa envolvida, sendo a cirurgia ortognática exigindo DC mais elevadas, lado acometido, sendo que o lado esquerdo teve doses mais baixas; Número de regiões de aplicações, quanto menos regiões, uso de doses mais baixas e Situação do ciclo, sendo que ciclos completos, à DC mais altas. Foi concluído que a fototerapia laser é efetiva no tratamento de parestesias orofaciais, no entanto, as mulheres e os que tinham a faixa etária de 19 a 42 anos foram os que mais tiveram desfechos satisfatórios. A dose cíclica/terapêutica média utilizada foi eficiente, sendo que as variáveis de tipo de nervo lesionado, número de regiões de aplicação e causa envolvida são fundamentais identificá-las para estabelecer a melhor dose a ser utilizada. Através de um protocolo individualizado e parâmetros específicos no tratamento de parestesia orofacial com laserterapia, é possível melhorar a qualidade de vida desses pacientes.

Fungos são agentes patogênicos em humanos e animais. Entre os fungos patogênicos mais importantes estão espécies de leveduras que pertencem ao gênero Candida. A C. albicans, pode causar ampla gama de doenças, dentre infecções de mucosas superficiais (candidíase vulvovaginal e orofaríngea) podendo invadir tecidos ameaçando a vida. Em decorrência das características inerentes aos seres eucariotos, presenciadas tanto nos fungos como no hospedeiro humano, as drogas antifúngicas detêm, em sua maioria, baixa toxicidade seletiva. Isto ocasiona uma considerável redução do arsenal terapêutico antifúngico. A terapia fotodinâmica antimicrobiana (TFD), tem sido defendida como uma alternativa aos agentes antimicrobianos devido ao uso extensivo e inadequado que, gradualmente, levou ao desenvolvimento de resistência generalizada. Diante disto, este estudo teve como objetivo, avaliar, in vitro, a eficácia da Terapia Fotodinâmica Antimicrobiana associando Azul de Taylor com um emissor LED Vermelho (41,2 mW, λ630 ɳm ± 1 ɳm, 20 J/cm2) sobre a cultura de Candida albicans. Os ensaios foram efetuados utilizando cepa de Candida albicans (ATCC 900228) crescidas em estufa bacteriológica (UltraSafe HF 212, PR, Brasil) 37◦C por 24 horas de acordo com a curva de crescimento do fungo. As colônias foram ressuspendidas em solução salina estéril 0,85 % NaCl, na concentração de 2 x 108 células/mL. Foram realizados três protocolos experimentais utilizando 750 ɳg/mL do fotossensibilizador e 20 J/cm2 de densidade energética, sendo divido em três grandes grupos; TFDa única, dupla aplicação em uma única sessão e dupla aplicação após 24 hrs, com subgrupos divididos em Controle (apenas C. albicans), DMMB (apenas o fotossensibilizador, TFDa (união dos fatores). Os resultados, mostraram reduções de respectivas de 99,9 % e 99,991 % da carga fúngica total nos Protocolos 3 e 2 utilizados, sendo o Protocolo 2 o melhor resultado apresentado com metodologia totalmente compatível com a realidade clínica, com capacidade de utilização em diversos outros microrganismos existentes.

A nanotecnologia é uma área de pesquisa multidisciplinar que engloba biologia, física, química e engenharias para o desenvolvimento, manipulação e aplicação de materiais na escala nanométrica. Embora as nanopartículas metálicas possam ser sintetizadas utilizando uma variedade de processos físicos e químicos, estes podem apresentar algumas desvantagens. No entanto, a síntese biológica ou biossíntese de nanopartículas elimina os problemas ocasionados pelos métodos convencionais, proporcionando a obtenção de nanopartículas ambientalmente amigáveis. A biossíntese de nanopartículas é caracterizada pelo uso dos mais diversos sistemas biológicos. Contudo, os fungos são os candidatos mais eficientes para a fabricação de nanopartículas metálicas intra e extracelulares. O objetivo desse trabalho é sintetizar e caracterizar nanopartículas de prata através do fungo endofítico Phyllosticta capitalensis isolado da Pyrostegia venusta e comparar duas metodologias de síntese, utilizando o fragmento micelial e a biomassa fúngica. Os resultados mostraram que somente a metodologia I - biomassa fúngica tem a capacidade de sintetizar as nanopartículas. Esse fato foi confirmado através da mudança de coloração após 72 horas da adição do nitrato de prata e a presença da banda de absorção na região de 400 nm.  As nanopartículas de prata formadas apresentaram formas esféricas, tamanho médio de 51,33 nm e potencial zeta de  -22,5 mV. Através da espectroscopia no infravermelho com transformada de Fourier foram detectadas bandas correspondentes à vibrações de álcool, metileno, amina, éster, resíduo de nitrato, amina alifática, fosfato e hidrocarbonetos aromáticos. Esses resultados mostram que a utilização do filtrado celular da biomassa fúngica do fungo Phyllosticta capitalensis em pH 9 é promissor para síntese de nanopartículas de prata.

A resposta inflamatória é definida como uma reação de defesa do organismo frente a agentes agressores cujo objetivo final é devolver a homeostase e recuperar os tecidos lesados. Dentre os principais tipos celulares envolvidos neste processo encontramos os mastócitos, cuja função é sintetizar e liberar potentes mediadores químicos do processo inflamatório, através da degranulação. É conhecido que o Laser de baixa potência pode aumentar a degranulação de células mastocitárias, provocando a liberação de substâncias como a histamina, serotonina e bradicinina. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos das fototerapias LED Infravermelho (l 850 ± 10 nm, emissão contínua, Dose = 20 J/cm²) e LED Violeta (l 405 ± 10 nm, emissão contínua, Dose = 20 J/cm²), a quantidade total de mastócitos após o estímulo da luz, bem como seu percentual de degranulação, em tecidos de mucosa oral de ratos. Para tanto, foram utilizados 27 ratos da linhagem Wistar, que foram distribuídos aleatoriamente em três grupos: Grupo Controle, Grupo LED IV (l 850 ± 10 nm) e Grupo LED Violeta (l 405 ± 10 nm).Os tempos de remoção do tecido oral foram: imediatamente, 20 minutos, 45 minutos e 2 horas após o procedimento de irradiação. Após a remoção, os tecidos da mucosa oral foram processados para análises histológicas com coloração Azul de Toluidina e contagem dos mastócitos íntegros e degranulados. Os resultados apresentaram aumento do número total de mastócitos em todos os grupos em relação ao grupo controle, sendo maiores no grupo do LED IV. O índice de degranulação foi maior no grupo irradiado com LED Violeta. 

Preocupações crescentes com a segurança à saúde, impactos sociais e o comércio justo intensificaram o interesse industrial pelo uso de produtos naturais em formulações cosméticas comerciais. Atualmente, vários estudos estão focados em extratos de plantas, mas frutas tropicais, como a goiaba, rambutan, uva e abiu permanecem ainda inexploradas e, consequentemente, subutilizadas.  Esta pesquisa tem como objetivo avaliar o potencial do uso de extrato de frutos ricos em substâncias fenólicas como agente aditivo fotoprotetor para formulações de protetor solar. Foram avaliados extratos dos frutos de Nephellium lapaceum (Rambutan), Pouteria caimito (Abiu), Psidium guajava (Goiaba) e Vitis spp. (Uva) visando o desenvolvimento de um produto comercial adaptado às condições regionais do estado da Bahia para não apenas inovar na descoberta de novas substancias mas para incentivar o desenvolvimento econômico regional. A triagem fitoquímica revelou a presença de flavonóides e taninos e a ausência de cumarinas em todos os extratos. A revisão bibliográfica e prospecção de patentes revelou não existir trabalhos e/ou produtos cosméticos contendo em sua composição extratos dos frutos avaliados, de forma isolada ou combinados entre si, com finalidades fotoprotetoras e antioxidantes. Os extratos testados apresentaram resultados antioxidantes positivos. A atividade fotoprotetora não foi observada quando os extratos foram utilizados isoladamente em formulações dermocosméticas. Porém ao serem associados a formulações contendo filtros solares sintéticos, os extratos atuaram de forma sinérgica, potencializando o Fator de Proteção Solar (FPS) em mais de 200,0%. O uso desses ativos em formulações fotoprotetoras pode favorecer a redução da concentração dos filtros solares orgânicos sintéticos utilizados na sua composição, redução da toxidade associada a esses filtros, bem como a potencialização do seu FPS. A produção de cosméticos a partir de substâncias de origem natural com tais atividades será de grande importância para setor industrial brasileiro, podendo reduzir o custo de produção, considerando a grande biodiversidade existente no país, representando um grande impacto científico e econômico.

 O termo desnutrição é definido pela Food and Agriculture Organization (FAO) como uma condição fisiológica anormal causada pelo consumo inadequado, desbalanceado ou excessivo de macronutrientes como carboidratos, lipídios e proteínas e/ou micronutrientes como vitaminas e minerais, que são necessários ao desenvolvimento do organismo. O presente estudo visa avaliar o potencial nutricional de cinco microalgas marinhas: Chaetoceros calcitrans, Chaetoceros gracilis, Thalassiosira pseudonana Thalassiosira fluviatilis, Skeletonema costatum e cinco microalgas dulcícolas: Chlamydocapsa bacillus, Ankistrodesmus fusiformis, Coelastrum microporum e Kirchneriella lunares,  provenientes do Banco de Microalgas do Instituto de Biologia da Universidade Federal da Bahia, como possível indicação de complemento proteico alimentar. Inicialmente serão determinados os teores de proteína de cada microalga. Para quantificação, as células foram lisadas e as proteínas precipitadas com acetona. A dosagem foi realizada pelo método de Bradford (1976) e de Lowry (1951). Para os ensaios de toxicidade dos extratos algais foram utilizadas larvas de Artemia salina como modelo experimental. Os resultados obtidos desta bioprospecção indicam as espécies dulcícolas Ankistrodesmus fusiformis, Coelastrum microporum e Kirchneriella lunarescomo candidatas a serem usadas como complemento alimentar por apresentarem maior dosagem de proteína em sua biomassa, sendo de 49, 47 e 41%, respectivamente, e não demonstrarem toxicidade, de acordo com os testes utilizado Dentre as espécies marinhas a Skeletonema costatum foi a que apresentou maior concentração proteica (35%), seguida da Chaetoceros gracilis e da Thalassiosira pseudonana, ambas com 29% do peso seco?. O método de Bradford não se mostrou apropriado para dosagem de proteínas em microalgas, resultando num sub-dimensionamento da produção. A dosagem por Lowry refletiu mais precisamente o conteúdo proteico, dentre as todas as espécies avaliadas.

A família Erythroxylaceae é constituída por quatro gêneros dentre os quais Erythroxylum apresenta-se como o mais importante, por conter em sua constituição cerca de 97% das espécies da família. Este gênero apresenta importantes substancias bioativas como alcaloides tropânicos, cumarinas, diterpenos, flavonoides, fenilpropanoides, esteroides, taninos, triterpenos e terpenóides indicando propriedades biológicas como antioxidantes e antibacterianas, propriedades farmacológicas como estimulante do sistema nervoso central, anti-inflamatória, antifúngica, antiviral, antitumoral, além de  atividades medicinais no tratamento de distúrbios renais, sinusites, dor de estômago, amenorreia, influenza, injúria e no combate a fadiga. O gênero possui ampla distribuição, sendo mais encontrado nas regiões tropicais e subtropicais das Américas, África, Sudeste Asiático e Oceania. Várias espécies deste gênero são exclusivas do Brasil, algumas com distribuição restrita à região Nordeste, sendo encontradas em áreas do semi-árido (caatinga) principalmente nos Estados de Pernambuco, Ceará, Sergipe, Alagoas, Bahia, Piauí e Paraíba. Muitas das espécies de ocorrência na região do semi-árido ainda não tiveram seus potenciais químicos e farmacológicos avaliados. Baseado nestes aspectos, este trabalho teve como objetivo determinar a presença de substâncias bioativas e atividades biológicas em quatro espécies do gênero Erythroxylum, avaliando extratos de folhas e caules com seus potenciais biotecnológicos e uso cosmético. Foram obtidos 40 extratos e submetidos aos testes de letalidade da Artemia salina, atividade antioxidante (sequestro do radical DPPH, inibição da oxidação do β-caroteno/ácido linoléico, teores de fenólicos e flavonóides totais), atividade antibacteriana e atividade inibitória da enzima acetilcolinesterase. Foram aplicadas as técnicas de PCA e HCA de analise multivariada permitindo a diferenciação por similaridade das amostras, com formação de três grupos distintos, quando empregados os resultados do teste de atividade antioxidante (DPPH). No teste de letalidade da A. salina houve destaque para três extratos EAFEN, EMCEN e EMCERIII com CL₅₀ = 1.374, 1.007 e 0,703 mg/mL, respectivamente com potenciais de baixa citotoxicidade. O extrato EMCERIII apresentou CIM de 0,25 mg/mL para E. coli e 0,50 mg/mL para S. aureus demonstrando uma boa atividade antibacteriana. Para a atividade antioxidante (DPPH) os extratos das folhas EMFERI, EAFERII, EAFERI, EHFERI e caules EACERII, EACERI, EMCERII, EACEN, EMCERI e EACERIII demonstraram os menores valores de IC₅₀ com 0,043; 0,044; 0,044; 0,050; 0,060; 0,071; 0,072; 0,077; 0,088 e 0,089 mg/mL, respectivamente. O Extrato EMCERIII foi empregado no processo de pré-formulação através da obtenção de uma emulsão lipossomal e incorporação em formulações cosméticas (LIC e LIG). No processo de pós-formulação, o LIC manteve toda sua integridade diante dos testes de atividade acelerada e leve aumento em sua atividade antioxidante tanto no sequestro dos radicais livres DPPH, como nos teores de fenólicos e flavonóides totais. Diante do exposto, os extratos das folhas e caules das espécies Erythroxylum e os produtos derivados demonstraram-se bastantes promissores no desenvolvimento de produtos biotecnológicos, com destaque para o extrato EMCERIII que devido ao seu alto poder antioxidante e antibacteriano pode ser empregado no desenvolvimento de cosméticos.

Corynebacterium pseudotuberculosis responsável pela Linfadenite Caseosa (LC) doença infecto-contagiosa, de caráter crônico, que geralmente acomete pequenos ruminantes comprometendo a economia dos pequenos produtores e das regiões que contam com o agronegócio. A infecção em humano ocorre pelo manejo de animais, consumo de seus derivados crus ou em laboratórios, com poucos casos descritos e apenas um estudo no Brasil. O diagnóstico animal é relativamente fácil, mas em humanos apresenta complicações. O cultivo bacteriológico proveniente do conteúdo caseoso, seguido por testes bioquímicos constitui atualmente o teste padrão ouro. Objetivo: O presente trabalho se propõe a avaliar e comparar o crescimento bacteriano e a produção de antígenos para avaliação da sororreatividade humana de três cepas de Corynebacterium pseudotuberculosis. Métodos: Para contagem bacteriana e estudo da viabilidade celular em FACSCalibur (BD) foram realizados cultivos da cepa VD57 para os três tempos (24, 48, 72 horas) e comparação com cepas CAP3W(21) e CAPJ4(76) em 24 e 48 horas. Para produção do antígeno, foi utilizado o sobrenadante do cultivo com 48 horas das cepas VD57, CAP3W(21) e CAPJ4(76), semipurificados por técnica de partição em três fases (TPP). Foi produzido extrato em meio com e sem Tween somente para cepa CAPJ4(76). O perfil eletroforético dos quatro extratos foi analisado por SDS-PAGE em gel 12% e a sororreatividade avaliada em Western Blot com pool de amostras séricas do grupo Não Contactante (composto por 4 participantes sem histórico de contato com a bactéria ou consumo de carne crua ou mal cozida), grupo Contactante laboratório (composto por 4 indivíduos com histórico de contato por atividade em laboratório de microbiologia) e grupo Contactante fazenda (composto por 4 indivíduos com histórico de contato com animais infectados). Resultado: Na avaliação por FACs, evidenciou-se crescimento celular mais acelerado para cepa VD57 com resultado 10 vezes superior ao registrado por CAP3W(21) e CAPJ4(76). O ápice da viabilidade celular registrado foi de 48 horas, porém não foi identificada elevação considerável da mortalidade celular com 72 horas. O perfil eletroforético dos extratos produzidos revelou diferenças na expressão de Endereço: Av. Reitor Miguel Calmon s/n - Vale do Canela - CEP 40110-100 - Salvador / Bahia Tel : (71) 3283-8894Email: ppgbiotec@ufba.br Universidade Federal da Bahia Instituto de Ciências da Saúde Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia proteínas entre as três cepas, bem como para cultivos em condições diferentes para CAPJ4(76). Foi registrada intensa sororreatividade humana aos quatro extratos, confirmando a presença de proteínas antigênicas em todas as cepas, porém não foi possível identificar diferença no perfil de reconhecimento entre os grupos Contactantes e Não Contactantes em todos os extratos. Conclusão: A cepa VD57 apresenta ápice do crescimento e viabilidade no tempo de 48 horas de cultivo e na comparação entre as três cepas, demonstra crescimento e viabilidade superiores ao das demais. O perfil eletroforético dos extratos de cepas de Corynebacterium pseudotuberculosis cultivadas sob mesmas condições, apresentam similaridade no número de bandas e diferença no peso molecular. A utilização de Tween-80 no meio de cultivo, gera um acréscimo de 50% no número de bandas para CAPJ4(76). Todos os extratos produzidos apresentam antigenicidade para soro humano, porém não é possível discriminar o perfil de Contactantes do perfil de Não Contactantes.

As alergias são reações de hipersensibilidade imunológica do tipo I, desencadeadas pela ligação de alérgenos específicos a anticorpos do tipo IgE que afetam mais de 25% da população mundial. Nos pacientes que apresentam doenças e/ou reações alérgicas, pode-se observar que a maioria deles é tipicamente alérgica a ácaros. As doenças respiratórias causadas pelos ácaros são tratadas com medicação sintomática ou imunoterapia alérgeno-específica (AIT), com base em extratos purificados de corpo de ácaro, fezes ou ambos. No entanto, o uso de extratos brutos na imunoterapia contendo vários alérgenos não caracterizados pode levar a efeitos colaterais severos e à sensibilização do paciente aos alérgenos presentes na mistura. Ferramentas de bioinformática e engenharia genética possibilitam mudanças na estrutura de alérgenos completos, bem como nas regiões de epítopos de células B ou T como estratégia para formular imunoterapias hipoalergênicas. O objetivo deste estudo é a criação e implementação de um pipeline de análises de bioinformática estrutural que permita desenhar proteínas hipoalergênicas de ácaros, mantendo suas capacidades imunogênicas, para utilizações futuras em imunoterapias. Metodologias de bioinformática estrutural foram utilizadas para se analisar as estruturas dos alérgenos Der p 1 e Der p 21, do ácaro Dermatophagoides pteronyssinus. Ferramentas de imunoinformática foram utilizadas para escanear possíveis mutações em epítopos chave para a ligação com IgE. Após implementação efetiva do pipeline de análises estruturais, mutações desestabilizantes das regiões dos epítopos principais foram selecionadas de acordo com a variação da energia livre de Gibbs (kcal/mol) em relação às proteínas tipo-selvagem. Foram desenhadas e modeladas quatro versões mutantes para a proteína Der p 21 (mutações: E77G, D82P, E87S e K110G), além de três mutantes para Der p 1 (mutações: D189A, R147D, D189A). A proteína mutante D82P de Der p 21 encontra-se atualmente em processo de validação experimental e apresenta resultados promissores de hipoalergenização. Os resultados aqui apresentados contribuirão potencialmente para o desenvolvimento de vacinas recombinantes mais seguras paras as alergias aos ácaros da poeira no futuro próximo.

A concomitância de surtos entre diferentes arbovírus como Dengue, Zika vírus e vírus Chikungunya (CHIKV) com sintomatologia similar é de grande preocupação no país, principalmente apontando para um diagnóstico preciso. Este trabalho visa aprimorar o diagnostico do CHIKV de pacientes com quadros agudos da doença, através de análises da resposta imune humoral e a relação com o perfil proteico do CHIKV. A metodologia consistiu na utilização de soros positivos ao vírus pela técnica de Reação em cadeia da polimerase (RT-PCR), detecção sorológica pelas técnicas de ELISA de uso comercial (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay), Teste rápido e também um análise do padrão proteico viral pela técnica de Western-blotting. Os resultados mostraram que a resposta imune humoral está direcionada principalmente para as duas glicoproteínas virais E₁ e E₂. Por outra parte, a presença viral no soro pode ser detectada ainda em presença da Imunoglobulina M anti-CHIKV, não assim a presença de IgG anti-CHIKV que invalida a detecção de viremia. A utilização dos testes sorológicos de uso comercial mostrou que existe correspondência de resultados para a detecção do IgM anti-CHIKV, porém, para a detecção de IgG anti-CHIKV os resultados foram divergentes. Concluindo, mostrou-se que em indivíduos com quadros agudos da doença, o diagnóstico molecular viral e a presença de IgM anti-CHIKV podem coexistir, no entanto, a presença de IgG anti-CHIKV invalida a presença viral e o diagnóstico viral molecular.

Introdução: Diversos estudos utilizando helmintos e suas moléculas têm se baseado
na imunomodulação gerada por esses parasitos, na busca de potenciais terapêuticos
contra doenças alérgicas, inflamatórias e autoimunes. Nesse contexto, através da
tecnologia do DNA recombinante é possível produzir proteínas desses organismos
para a elucidação e caracterização dessas moléculas frente a doenças. Objetivo:
Identificar a proteína c4299 de Trichuris trichiura (Trichuris_c4299) no extrato proteico de vermes adultos desse helminto e expressar de forma recombinante a proteína Trichuris_c4299 para caracterização imunogênica. Metodologia: Para identificação de Trichuris_c4299 no extrato do verme adulto Trichuris trichiura foi realizado a análise do proteoma por meio de espectrometria de massa acoplado à cromatografia liquida (LC/MS/MS) utilizando o Q-ExactiveTM mass spectrometer. A caracterização da proteína foi realizada primeiramente in silico através de análises de bioinformática e, para isso, foram feitas predições das característica físico-químicas utilizando diferentes ferramentas. O gene codificante de Trichuris_c4299 foi sintetizado por empresa especializada e clonado no vetor pET28a(+) de expressão. A proteína recombinante foi expressa em sistema procarioto e purificada através de
cromatografia de afinidade acoplada a uma coluna de níquel HisTrap FF. A
imunoreatividade de Trichuris_c4299 recombinante foi analisada por meio de ensaios
imunológicos como ELISA e Dot Blot utilizando soro de pacientes infectados com
Trichuris trichiura. Resultados: A partir da análise do proteoma foi possível a
identificação de Trichuris_c4299 no extrato proteico de machos e fêmeas adultos de
Trichuris trichiura. A análise de bioinformática possibilitou a predição de diversas
características úteis de Trichuris_c4299 para a sua produção recombinante em
Escherichia coli. Além disso, foi padronizado a expressão e purificação da proteína
recombinante, e observou-se que a mesma apresentou reatividade no teste de ELISA
e de Dot Blot, mostrando assim potencial imunogênico. Conclusão: Nesse trabalho
foi possível determinar a presença de Trichuris_c4299 no proteoma dos vermes
adultos de Trichuris trichiura e efetuar a padronização da expressão e purificação
dessa proteína. Adicionalmente, observou-se que Trichuris_c4299 apresenta
imunoreatividade em soro de pacientes infectados. Sendo assim, essa molécula se
mostra um novo alvo para futuras investigações acerca de imunomodulação, seja para
doenças alérgicas ou para outras doenças inflamatórias e autoimunes.

Esta pesquisa teve como tema o reaproveitamento de resíduos domésticos e industriais
para o cultivo de microalgas como estratégia de barateamento dos processos de produção de
biomassa e, assim, viabilizá-los comercialmente. O primeiro estudo avaliou a influência de
microrganismos oriundos de efluentes domésticos e suplementação de glicose no cultivo de
microalgas. O crescimento de Chlorella vulgaris e Pseudokircheneriella subcapitata foi
comparado no efluente doméstico tratado não esterilizado e esterilizado como os meios de
cultura. A presença de bactérias reduziu a produção de biomassa total (menos que 3x) e do
acúmulo de lipídeos (menos que 2x), ou seja, a competição com outros microrganismos
influenciou negativamente nesses dois aspectos. Por outro lado, a combinação da
suplementação de nitrato e glicose mostrou-se uma estratégia bem-sucedida para mitigar esse
efeito negativo, pois houve a manutenção dos valores quando comparado com os meios sem
microrganismos. O segundo estudo envolveu o teste do rendimento da produção de biomassa
algal de Chlorella vulgaris durante o seu cultivo em distintas vinhaças de cana-de-açúcar (i)
vinhaça bruta, (ii) vinhaça diluída, e (iii) vinhaça tratada por digestão anaeróbia. Foram
avaliados também o efeito da adição de antibióticos e suplementação de nitrato e fosfato. A
vinhaça diluída e suplementada com antibiótico, nitrato e fosfato propiciou o melhor resultado
em crescimento específico (14x maior) e no acúmulo de biomassa (12,5% mais) que a vinhaça
diluída. Enquanto que o tratamento com a vinhaça tratada por digestão anaeróbia com adição
de antibiótico obteve o melhor resultado com acúmulo de lipídeos (2x maior) que a vinhaça
tratada suplementada. Logo, o estresse nutricional causado por escassez de nitrogênio na
vinhaça tratada por digestão anaeróbia pode estar influenciando no acúmulo de lipídeo celular.
Os dois tratamentos mencionados acima foram os que apresentaram as melhores respostas para
a produtividade lipídica. O terceiro estudo envolveu o cultivo da Pseudokirchneriella
subcapitata em dois tipos de vinhaça de cana-de-açúcar: vinhaça diluída e vinhaça tratada ou
efluente da digestão anaeróbia. Suplementações de nitrato e fosfato foram testadas aos meios
de cultivo. A melhor produção de biomassa e produtividade lipídica foram obtidas no
tratamento vinhaça diluída suplementada, cerca de 2x maior e 5,9x maior que seu controle,
respectivamente. Essa pesquisa demonstra o potencial uso de resíduos domésticos e industriais
como meio de cultivo para microalgas, não somente para a geração de biomassa e lipídeos, mas
também para o tratamento orgânico desses resíduos que têm diversos tipos de impactos
ambientais tais como eutrofização de corpos d’água, choque orgânico, químico e mudanças
físico-químicas do solo.

A linfadenite caseosa (LC), doença causada pela bactéria Corynebacterium pseudotuberculosis, é responsável por atingir grande parte dos ovinos provocando grande impacto negativo para a cadeia produtiva. Os estados do Nordeste assumem o maior número de casos de prevalência, em virtude de concentrar os maiores rebanhos de caprinos e ovinos do país. Assim como ocorre na LC, as infecções causadas por parasitos, em sua grande maioria, também geram enormes perdas econômicas na criação de ovinos. O agente etiológico de maior incidência nas infecções parasitárias entre os ovinos é o Haemonchus contortus. MicroRNAs (miRNAs) têm emergido como importantes moléculas regulatórias do sistema imune. Alguns miRNAs produzidos na infecção por patógenos intracelulares como Mycobacterium tuberculosis, por exemplo, podem regular negativamente a produção de citocinas como interferon-γ, aumentando-se, assim, a resistência do patógeno aos mecanismos de defesa. Para avaliar os níveis séricos de miRNAs em ovinos experimentalmente infectados com C. pseudotuberculosis e na co-infecção desta com o helminto Haemonchus contortus, correlacionando estes níveis com a intensidade da resposta Th1 é que este estudo foi realizado. Quatorze ovinos distribuídos em três grupos: controle (03), infectado (06) e co-infectado (05) foram examinados a partir de amostras de sangue e fezes. O sangue foi destinado para a realização do ELISA indireto anti-Corynebacterium pseudotuberculosis, ensaio de IFN-γ (Bovigam) e quantificação de microRNAs. A coleta de fezes foi destinada para realização da coprocultura e do parasitológico de fezes (OPG). O ELISA detectou no grupo dos ovinos infectados uma leve reatividade sorológica anti-Coryne e, no grupo dos animais co-infectados foi observado aumento dos títulos de anticorpos IgG. O Bovigam mostrou que células quando estimuladas com um controle positivo inespecífico (PKW), secretaram níveis elevados de IFN-γ. O estímulo com antígeno da cepa VD57, não apresentou diferenças em quase todos os tempos experimentais. A quantificação dos microRNAs revelou que dos seis microRNAs estudados, três apresentaram expressão (mir-29a, mir-29b e mir-99b) nos grupos controle, infectado e co-infectado ao longo dos tempos experimentais estudados