A nefropatia diabética está frequentemente associada ao aumento do estresse oxidativo pela geração de espécies reativas de oxigênio (ERO), as quais podem provocar uma sequência de respostas pró-inflamatórias, pró-apotóticas e disfunção endotelial nos rins. Novas estratégias terapêuticas são necessárias para atenuar e/ou prevenir a progressão da nefropatia diabética. Diante disso, este estudo avaliou o impacto de dois protocolos de exercício nas alterações oxidativas, inflamatórias e apoptóticas induzidas pelo diabetes mellitus tipo 1 (DM1) no tecido renal de ratas. Para tal, 30 ratas Wistar foram utilizadas e divididas em 5 grupos: CS - ratas controle sedentárias (n=6), CT – ratas controle treinadas (n=6), DS – ratas diabéticas sedentárias (n=6), DT – ratas diabéticas treinadas (n=6) e DPT – ratas diabéticas previamente treinadas (n=6). Apenas o grupo DPT foi submetido a quatro semanas de exercício antes da indução do diabetes. Em seguida, o DM1 foi induzido nos grupos DS, DT e DPT com estreptozotocina (40mg/kg, iv), e os grupos DPT e DT foram submetidos a 8 semanas de exercício. O grupo CT também foi submetido a 8 semanas de exercício após administração de citrato (0,1 M, iv). O tecido renal foi removido e destinado aos estudos de estresse oxidativo, imuno-histoquímica, ELISA e Western blot. Os nossos dados mostram que o exercício físico reduziu os níveis de TBARS e aumentou a atividade da superóxido dismutase no tecido renal de ratas submetidas ao treinamento físico. Contudo, somente o exercício prévio aumentou a atividade da enzima glutationa peroxidase. Além disso, o exercício reduziu a caspase-3, o p-p38 e a expressão de macrófagos M1 e aumentou a expressão de macrófagos M2 e Bcl-2, bem como os níveis IL-10 no tecido renal. Somente o exercício iniciado antes da indução do diabetes reduziu os níveis de TNF-alfa no grupo DPT. Em conclusão, nossos dados demonstram que o exercício físico de intensidade moderada melhorou o status redox, a inflamação e apoptose. Contudo, o exercício iniciado previamente a indução do diabetes promoveu efeitos adicionais por aumentar a atividade da glutationa peroxidase e reduzir os níveis de TNF-alfa no tecido renal das ratas Wistar. 

Introdução: Inflamação é uma resposta biológica complexa que envolve os sistemas imune, autonômico, vascular e somatossensorial, que cursa com a síntese de mediadores inflamatórios e indução de dor por ativação de nociceptores. Uma das causas mais comuns e impactantes de inflamação na saúde pública é a infecção por Staphylococcus aureus, principal causa de bacteremia, com piores desfechos clínicos hospitalares. Substâncias antioxidantes têm sido avaliadas quanto nesse contexto como alternativa terapêutica analgésica, antioxidante, anti-inflamatória, antitumoral e bactericida. Dentre elas, destacam-se os óleos essenciais de plantas aromáticas, como o β-cariofileno (BCP), e os ácidos graxos poli-insaturados, como o Ácido Docosahexanóico (DHA). Objetivo: Avaliar as atividades biológicas da associação BCP-DHA em modelos experimentais in vitro e in vivo de antinocicepção e inflamação. Materiais e métodos: Para tanto, os efeitos antinociceptivos foram avaliados em modelos animais através dos testes de contorção abdominal induzida por ácido acético, do edema de pata induzido por injeção intraplantar de formalina e da hipernocicepção de VonFrey. Para determinar os efeitos anti-inflamatórios, monócitos isolados do sangue periférico de homens adultos voluntários foram infectados com Staphylococcus aureus resistente à meticilina e incubados com tratamento, para posterior dosagem de citocinas e análise da expressão gênica. A capacidade antioxidante foi avaliada pelo método DPPH. Foi realizado o ensaio MTT para determinar a viabilidade celular das linhagens pulmonares A549 e BEAS frente ao tratamento com BCP-DHA e, em seguida, foram feitos os testes de adesão e migração com as doses das associações determinadas no teste anterior. Resultados: Efeitos antinociceptivos foram observados nos três modelos realizados ao comparar os grupos controle (salina) e tratados com BCP-DHA, obtendo significância estatística (p < 0,05) no teste de contorções abdominais induzidas por ácido acético, na avaliação dos flintches e lambidas de pata no modelo de injeção intraplantar de formalina e na hipernocicepção do teste de Von Frey. Houve redução significativa dos níveis de GM-CSF, TNFα, IL-1, IL-6 e IL-12, bem como aumento de IL-10 nos grupos submetidos ao tratamento com a associação BCP-DHA, assim como regulação negativa da expressão dos genes envolvidos na cascata de sinalização inflamatória intracelular (IL-2, IL-6, IRF7, NLRP3 e TYK2) em todos os grupos que receberam o tratamento, independente da presença de infecção. No teste do DPPH apenas o BCP apresentou sequestro significativo de radicais livre, com EC 50 = 2,82 ± 0,06 M. Houve atividade citotóxica significativa das 2 combinações de BCP-DHA testadas sobre linhagem tumoral A549, bem como importante inibição dos processos de adesão e migração celular. Observou-se subexpressão de genes envolvidos no ciclo celular, no reparo do DNA, da excisão de nucleotídeos, de bases mal pareadas e pós replicação, na manutenção de telômeros, oncogenes e supressores tumorais. Diante disso, nossos resultados sugerem fortemente que a associação de BCP-DHA surge como uma possível nova alternativa terapêutica com efeitos analgésico, anti-inflamatório, antiangiogênico, pró-apoptótico e antiproliferativo.

Gardnerella vaginalis é uma bactéria comensal da microbiota vaginal e o principal agente da vaginose bacteriana (VB), uma infecção vaginal estabelecida devido ao desequilíbrio nesse ecossistema. A patogênese da vaginose bacteriana não está bem estabelecida, no entanto é considerada a principal desordem vaginal que acomete mulheres em idade reprodutiva o que pode hipotetizar a influência dos hormônios sexuais femininos em sua patogênese. Objetivo: Avaliar a influência do 17β-estradiol (E2) na resposta imunológica induzida por Gardnerella vaginalis em modelos in vitro de macrófagos peritoneais murinos (MPMs) fêmeas e monócitos humanos do sangue periférico (hPMs) de mulheres, com ou sem atividade ovariana fisiológica. Metodologia: Realizado experimentos in vivo e in vitro. Para os experimentos in vivo nos animais, foram realizados: peso corporal, índice uterino e dosagem de estradiol e em humanos, foram realizados exames laboratoriais como hemograma, bioquímicos e hormonais. Para os experimentos in vitro os macrófagos peritoneais de fêmeas BALB/C cirurgia simulada (SHAM) ou ovariectomizadas (OVX) e os monócitos humanos do sangue periférico (hPMs) de mulheres em período fértil e menopausa foram subdivididos em três grupos: células inoculadas com G. vaginalis, células com salina estéril, ambas por 6 horas, e células pré-tratadas com 17β-Estradiol (E2), por 6 horas, e inoculadas com G. vaginalis, também por 6 horas. Marcadores inflamatórios como: citocinas GM-CSF, IL-1β, TNF-α, IL-6, IL-12, IL-23, IL-27 e IL-10, nitritos totais, peróxido de hidrogênio (H2O2), foram mensurados em sobrenadante de cultura e a expressão dos genes TLR-2, NF-kB e ERα e ERβ Além disso, uma curva de crescimento foi realizada em dois grupos. O grupo um, apenas com G. vaginalis e o grupo dois, G. vaginalis com 17β-estradiol, durante um período de 24 horas. Resultados: Para a análise da curva de crescimento, pode ser constatada a atividade inibitória do E2 sobre a G. vaginalis. Para os experimentos em animais: In vivo, fêmeas SHAMs apresentaram maior peso uterino e maior concentração de estradiol, enquanto fêmeas OVX apresentaram maior peso corporal. In vitro, a concentração das citocinas, IL-6, IL-8, IL-10 e os marcadores inflamatórios, nitritos totais e o peróxido de hidrogênio (H2O2), apresentaram níveis elevados em MPMs de fêmeas SHAM e OVX inoculadas com G. vaginalis quando comparados com salina estéril. Ao tratamento com E2, os MPMs das fêmeas OVX apresentaram maiores níveis de IL-10 e peróxido de hidrogênio quando com parados com OVX sem tratamento. Entretanto, apenas o peróxido de hidrogênio se equiparou aos MPMs das fêmeas SHAM. Para as expressões gênicas de TLR-2, NF-kB e ERα e ERβ resultado similar foi observado nos modelos SHAM e OVX entre infectados e salina estéril. As comparações entre as células infectadas dos modelos SHAM, OVX e OVX tratados com E2 também apresentaram maiores níveis de citocinas e marcadores inflamatórios e expressões gênicas para células do modelo SHAM, com exceção apenas para expressão do ERβ. Para os experimentos em humanos: In vivo, todos os sujeitos de pesquisa selecionados estavam saudáveis, porém foi observado maior concentração de glicose, colesterol total, LDL e TGP nas mulheres na fase de menopausa e maior concentração de leucócitos nas mulheres em período fértil. Para a dosagem sérica dos hormônios sexuais foi observado que mulheres em período fértil apresentaram maiores concentrações de 17β-estradiol e progesterona, enquanto as mulheres na menopausa, concentrações elevadas dos hormônios folículo estimulante (FSH) e luteinizante (LH). In vitro, os hPMs infectados com G. vaginalis de mulheres no período reprodutivo e na menopausa apresentaram maiores níveis de nitritos totais, H2O2 e citocinas quando comparado com salina. Entretanto, os hPMs infectados de mulheres na menopausa apresentaram maiores níveis de H2O2 em comparação com hPMs de mulheres no período reprodutivo. Em se tratando das citocinas as células tratadas com E2 não se equipararam às com E2 endógeno, exceto IL-10. Conclusão: Aos experimentos em animais e humanos, em relação à influência do E2 na resposta inflamatória aguda ao desafio, in vitro, por G. vaginalis, observa-se que o hormônio apresenta característica imunomodulatória, mas não podendo ser, exclusivamente, definida como pró ou antiinflamatória. Neste estudo, para o E2 endógeno, todas as citocinas, marcadores inflamatórios e expressões gênicas apresentaram maiores níveis, tanto em MPMs quanto para hPMs. Ao tratamento com E2, os MPMs de fêmeas OVX e hPMS de mulheres na menopausa apresentaram similaridade de resposta para os níveis de IL-10 em relação as células com E2 endógeno, indicando uma ação anti-inflamatória. Porém, os genes de reconhecimento e desencadeamento de inflamação aguda também apresentaram similaridade entre MPMs tratadas com E2 em relação às células com E2 exógeno. Influências fisiológicas, como a progesterona endógena, podem contribuir para que células apresentem características de resposta inflamatória aguda, e o tratamento de células, exclusivamente com E2, não tenha resultado em uma equiparação de resposta de células com hormônios sexuais endógenos. Entretanto, o E2 apresentou característica bacteriostática em relação a proliferação G. vaginalis, podendo este hormônio modular fatores de virulência deste microrganismo, assim, contribuindo para uma ausente ou discreta resposta imunológicas no curso da vaginose bacteriana.

As doenças crônicas não transmissíveis (DCNT) são responsáveis por cerca de 70% de todas as mortes no mundo. Neste cenário, a hipertensão arterial sistêmica (HAS) e o diabetes mellitus tipo 2 (DM2) são doenças que apresentam vários aspectos em comum. Nelas biomarcadores oferecem uma compreensão dos processos de doenças e podem beneficiar a detecção precoce, o tratamento e o seu manejo. Desse modo, o objetivo deste estudo foi avaliar as concentrações de biomarcadores inflamatórios no soro de pacientes com diferentes gravidades de DM2 e HAS bem como analisar as correlações entre interleucinas e a gravidade da doença. Inicialmente, pacientes previamente diagnosticados com DM2 e HAS foram estratificados em diferentes graus das doenças, visando detectar os fatores que mais influenciam nas complicações das doenças supracitadas. Os grupos foram divididos em baixo risco (1), risco moderado (2), risco alto (2), risco muito alto (4), de acordo com a Sociedade Europeia de Cardiologia, a qual correlaciona os valores da pressão arterial com a presença de fatores de risco. Para realização desse trabalho, voluntários foram recrutados para aferição da pressão e foi realizada análise da composição corporal através da bioimpedância. Foram coletados sangue desses pacientes para dosagens bioquímicas e para realização de ELISA, visando detectar as concentrações das citocinas IL-17, IL-1β, IFN-γ, TNF-α e IL-10 no soro. As análises estatísticas foram realizadas utilizando o teste Kruskal-Wallis, e as correlações foram analisadas através do software R Studio. Observamos que quanto maior a gravidade, maior a concentração sérica de citocinas pró-inflamatórias, entretanto, não foi observada diferença significativa entre os sexos ou período de climatério. Correlações positivas fortes foram encontradas entre IL-17, IL-1β e IFN-γ do grupo de baixo risco, entretanto, essas correlações são perdidas conforme aumenta o grupo de risco. Esses achados sugerem que a inflamação está presente contribuindo para o agravamento da HAS e DM2. Através de análises bayesianas encontramos a hiperglicemia exercendo um papel central na modulação do estado pró-inflamatório. Esse estado pode ser alterado com a prática de atividade física, confirmando o seu efeito benéfico e protetor. Este é o primeiro trabalho que mostra a complexa interação entre diferentes biomarcadores no DM2 e na HAS, principalmente a hiperglicemia como centro indutor da inflamação, e como a interação desses marcadores aumenta a gravidade das doenças.

Uma das principais alterações do diabetes mellitus tipo 1 (DM1) é a redução progressiva das células β pancreáticas, e consequentemente da produção de insulina. A peroxidação lipídica, citocinas pró-inflamatórias, e o fator de transcrição nuclear (NF-kB), desempenham papel importante na disfunção e morte de células β durante o DM1. Além disso, o fator de crescimento transformante (TGF-β1) e a fibrose participa do desenvolvimento do diabetes mellitus (DM). Já foi demonstrado os efeitos benéficos do exercício físico sobre complicações em diversos órgãos decorrentes da DM. No entanto, não há estudos que trate seus efeitos sobre ilhotas de langerhans de ratas diabéticas ovariectomizadas.  Para isso, ratas wistar foram anestesiadas e submetidas à ovariectomia bilateral. Após a recuperação cirúrgica, os animais receberam injeção de 40 mg/kg de estreptozotocina (STZ) para a indução do DM1 ou de tampão citrato 0,1M, pH 4,5, e foram divididos em quatro grupos experimentais: 6 ratas controles sedentárias OVX (CSO); 6 controles previamente treinadas OVX (CPTO); 6 diabéticas sedentárias OVX (DSO); e 6 diabéticas previamente treinadas OVX (DPTO). Os animais dos grupos DPTO e CPTO foram submetidos a quatro semanas de treinamento aeróbico previamente à indução do DM1. Após as quatro semanas foi realizada indução do DM1 nos animais dos grupos DSO e DPTO. Em seguida, os grupos CPTO e DPTO foram submetidos ao mesmo protocolo de exercício físico aeróbico regular de intensidade moderada, o qual consistiu em corrida em esteira motorizada por um período de oito semanas. O exercício físico não aumentou o conteúdo de insulina e massa de células β nas ilhotas de langerhans do grupo DPTO. Contudo, diminuiu o conteúdo de glucagon e massa de células α, mostrando o efeito benéfico do exercício sobre o hormônio contra-regulador da homeostasia da glicose no sangue.  Além disso, a glicose do sangue do das ratas DPTO foi menor que a das ratas DSO. O exercício físico também diminuiu a expressão de TGF-β1 nas ratas DPTO em relação as ratas DSO, bem como também diminuiu a fibrose nessas ilhotas. O exercício físico reduziu o estresse nitrativo pela redução da marcação para nitrotirosina no grupo DPTO. Além disso, o exercício físico exerceu efeito fundamental na redução da expressão do fator de transcrição NF-kB. Esses resultados mostram o efeito benéfico do exercício físico previamente a indução do diabetes sobre a expressão de marcadores inflamatórios e oxidativos, estrutura das ilhotas e conteúdo do hormômio contra-regulador da concentração da glicose sanguínea.

A Pimpinella anisum Lineu é utilizada para aumentar a produção de leite materno, porém de forma empírica por mães com hipogalactia, sendo que sua eficácia, segurança, dose efetiva e mecanismos de ação devem ser comprovados. Este estudo avaliou o perfil fitoquímico e a atividade galactagoga do extrato etanólico (EEPA), frações das sementes de P. anisum e do composto isolado anetol, bem como a toxicidade de EEPA. Ratas Wistar lactantes amamentando sete a oito filhotes cada, foram divididas em grupos tratadas diariamente por via intraperitoneal com (n=6): a) 0,4 ml de água destilada; b) EEPA nas doses de 12,5; 25 e 50 mg/Kg; c) FH nas doses de 12,5; 25 e 50 mg/Kg; d) FD nas doses de 12,5; 25 e 50 mg/Kg, e) FAE nas doses de 12,5; 25 e 50 mg/Kg; f) FB nas doses de 6,25; 12,5 e 25 mg/Kg e apenas o g) anetol nas doses de 12,5; 25 e 50 mg/Kg; por via oral.  Foram determinados o ganho de peso diário e total da ninhada, a estimativa da produção de leite em 1 h de amamentação, a perda de peso da rata lactante e o tempo de amamentação do 4º ao 18ª dia de vida dos filhotes. No 19º dia, as ratas foram ordenhadas para determinar o teor energético e os constituintes majoritários do leite, sendo eutanaziadas no 20º dia e removidas as glândulas mamárias para a análise histológica. No 2º experimento, as concentrações de prolactina e ocitocina foram dosadas na adenohipófise ou neurohipófise, soro e glândula mamária nas ratas no 14º e 21º dia de lactação, divididas nos seguintes grupos (n=6): a) 0,4 mL água destilada, b) EEPA (12,5 mg/Kg) e c) anetol (50 mg/Kg). Toxicidade frente à Artemia salina (12,5; 25; 50, 100 e 200 μg/mL) e toxicidade aguda com determinação de DL50 com ratos machos e fêmeas Wistar foram analisadas para os grupos (n: 3): a) etanol 10%, b) 5, 50, 300 e 2000 mg/Kg de EEPA e c) 0,4 ml água destilada. Atividade galactagoga foi observada apenas com o EEPA (12,5 mg/Kg), fração de diclorometano (25 mg/Kg) e anetol (50 mg/Kg), pois houve maior ganho de peso diário (24,8%, 11,6%, 10,2%) e total (28,1%, 11,37%, 9,7%), e estimativa de produção de leite (32,6%, 40%, 22,4%) (p < 0,05), sem alterações na perda de peso da rata lactante e no tempo de amamentação (p > 0,05) em relação ao controle. EEPA aumentou a concentração de proteínas totais e colesterol (84,7% e 185%), a FD aumentou a concentração de lactose, lipídios totais e colesterol (27,6%, 140,4% e 140%) e o anetol aumentou todos os constituintes em relação ao controle (p < 0,05). Embora as glândulas mamárias histologicamente estivessem em processo de involução, o menor número de lóbulos e alvéolos do EEPA e o menor número de alvéolos da FD e anetol indicam que estavam distendidos e a glândula estava mais ativa anteriormente. As maiores concentrações de prolactina adenohipofisária, sérica e na glândula mamária, aos 21 dias foram encontradas com EEPA e anetol (p < 0,05). Aumento da concentração de ocitocina ocorreu ao 14º dia na neurohipófise, e no soro do EEPA e apenas na neurohipófise do anetol. EEPA não apresentou toxicidade aguda nem morte dos animais. Assim, as sementes de P. anisum possuem atividade galactagoga atribuída a presença de compostos com atividade estrogênica (β-sitosterol, estigmasterol, anetol e seus polímeros) e antagonistas de dopamina (anetol) que estimulam a maior produção de prolactina, levando às alterações histológicas da glândula mamária, constituintes e quantidade de leite, refletindo no maior crescimento da ninhada. 

INTRODUÇÃO/OBJETIVO: Hipertensão arterial sistêmica (HAS) e diabetes mellitus do tipo 2 (DMT2) são importantes doenças crônicas não transmissíveis (DCNT) responsáveis por elevada mortalidade associada ao risco cardiometabólico. O envelhecimento é marcado pelo amplo espectro de modificações fisiológicas que configuram os idosos como grupo de risco para o desenvolvimento de DCNT. A terapia medicamentosa da HAS e DMT2 frequentemente é acompanhada pela prática de atividade física, e esta abordagem é associada à redução do risco cardiometabólico. Entretanto, pouco se sabe sobre a existência de perfis de benefícios terapêuticos distintos entre homens idosos e adultos hipertensos e diabéticos praticantes de atividade física. Com isso, este trabalho teve por objetivo comparar a influência da pratica atividade física entre homens adultos ou idosos, hipertensos e diabéticos, sobre parâmetros bioquímicos, antropométricos e inflamatórios relacionados a patogênese da HAS e DMT2. MÉTODOS: Neste estudo, 94 homens portadores de HAS e DMT2 foram incluídos. O trabalho contou com a aplicação de uma versão reduzida e validada do questionário internacional de atividade física (IPAQ) e do questionário de avaliação de qualidade de vida e saúde (QVS-80). Os indivíduos praticantes de atividade física foram selecionados pela prática de pelo menos 150 minutos de atividade física por semana por um período de pelo menos três meses. Indivíduos com idade igual ou superior a 60 anos foram classificados como idosos. Em seguida, foi realizada a avaliação antropométrica dos participantes, onde foram coletados dados de massa corpórea, composição corpórea, altura e circunferência de cintura. Após a sugestão de jejum de pelo menos 8h, uma amostra de sangue foi coletada de cada participante para dosagem sérica de marcadores bioquímicos (HDL, LDL, VLDL, triglicérides e glicose), inflamatórios (IL-1β, IL-17, IFN-γ, TNF-α e IL-10) e hormônios sexuais (testosterona total e estradiol. RESULTADOS: Homens adultos e idosos praticantes de atividade física apresentaram mais massas magra e óssea, bem como menor massa gorda do que indivíduos sedentários. A massa magra participou de um eixo de múltiplas correlações negativas com marcadores antropométricos, correlacionando-se negativamente com a razão entre a circunferência de cintura e estatura, massa gorda e índice de massa corporal. Em idosos praticantes de atividade física, a massa magra ainda se correlacionou negativamente com marcadores inflamatórios sistêmicos e positivamente com a IL-10 e com o estradiol sérico. Homens adultos e idosos praticantes de atividade física também apresentaram menores concentrações séricas de LDL, VLDL, triglicérides e de glicose em jejum do que indivíduos sedentários. Os idosos praticantes de atividade física exibiram menores concentrações séricas de IL-1β e TNF-α do que indivíduos de adultos sedentários, bem como menores valores para as concentrações séricas de IL-17, IL-1β, TNF-α e IFN-γ do que a sua contraparte sedentária. Neste estudo não detectamos diferenças entre as concentrações séricas de testosterona e estradiol entre os grupos. CONCLUSÃO: A prática de atividade física mostrou-se benéfica tanto para homens adultos como para homens idosos diabéticos e hipertensos, configurando, nestes, um menor risco cardiovascular associado à patogênese destas doenças. No entanto, os nossos resultados sugerem que, para homens portadores de HAS e DMT2, a prática de atividade física pode ser mais valiosa do que a idade na modulação de marcadores fisiopatológicos destas comorbidades, principalmente por participar da regulação de das concentrações séricas de marcadores da inflamação sistêmica relacionados ao risco cardiometabólico.

Evidências clínicas e experimentais apoiam a hipótese de que os esteroides sexuais regulam a resposta imunológica e, consequentemente, exercem efeitos sobre condições patológicas adversas, como as infecções bacterianas. De um modo geral, o paradigma da influência hormonal sobre a resposta imunológica estipula que o estrógeno aumenta essa resposta, enquanto que a testosterona suprime. Contudo, dados na literatura ainda são controversos. Ainda, há uma lacuna no que diz respeito ao papel do estrógeno nas infecções por bactérias Gram-positivas, como S. aureus. O objetivo deste estudo foi avaliar a influência da ovariectomia e do 17β-estradiol na resposta imunológica induzida por S. aureus em um modelo in vitro de macrófagos peritoneais murinos (MPMs) e monócitos humanos do sangue periférico (hPMs) e em um modelo in vivo. Para isso, camundongos fêmeas BALB/c foram ovariectomizadas (OVX) ou sham-operadas (Sham). No modelo animal, as fêmeas foram inoculadas intraperitonealmente com S. aureus ATCC 25923 ou salina estéril. Os animais foram eutanasiados em 7 períodos diferentes com intervalo de 24 horas cada e 10 fêmeas (n = 5 Sham/n = 5 OVX) foram agrupadas para cada período. Após a eutanásia, amostras de sangue foram coletadas para contagem total e diferencial de leucócitos e quantificação de S. aureus por RT-PCR. O útero e o baço foram removidos e pesados. O soro foi destinado para avaliação dos níveis de estradiol. Os pulmões foram removidos e fracionados para realização da análise imuno-histoquímica para detecção de macrófagos (anti-CD68) e expressão gênica relativa de IL-6, IL-1β e TNF-α por RT-PCR. Os resultados mostraram que fêmeas OVX apresentaram esplenomegalia e resposta tardia de monócitos em comparação com às shams. A inoculação intraperitoneal causou bacteremia em ambos os grupos, e as fêmeas OVX apresentaram um recrutamento pulmonar tardio de macrófagos. Além disso, as fêmeas OVX apresentaram maior expressão gênica de IL-1β, TNF-α e IL-6. A maior expressão de IL-6 em comparação às fêmeas sham foi observada mesmo na ausência da infecção. No modelo in vitro foi realizado o isolamento de macrófagos peritoneais (2 x 105 ), de camundongos fêmeas shams (n=3) e OVX (n=3) e machos (n=3), induzidos por tioglicolato e que foram inoculados com S. aureus por 6 horas. Os macrófagos obtidos das fêmeas OVX e dos machos foram previamente tratados por 24 horas com 17β-estradiol (E2) (10-7 M). Os macrófagos foram coletados e destinados para avaliação da expressão gênica relativa de TNF-α, IL-1β, IL-6, IL8 e TLR2. Os resultados mostraram que o tratamento com E2 diminuiu a expressão gênica das citocinas, com exceção de IL-8, em que os MPMs de machos apresentaram um aumento da expressão. Ainda, E2 diminui a expressão gênica do receptor TLR2. No modelo in vitro de hPMs, foram selecionados seis homens e seis mulheres e os hPMs foram isolados a partir de amostras do sangue periférico dos voluntários. Nas mulheres, o sangue foi coletado tanto no período menstrual quanto no período fértil. Após 24h em estufa de CO2, os hPMs foram inoculados por S. aureus por 6 horas. Após esse período, o sobrenadante foi coletado para análise de citocinas por Luminex e os hPMs removidos para análise de 84 genes envolvidos na resposta do hospedeiro a infecções bacterianas por RT-PCR array. Observou-se que, em comparação aos hPMs masculinos, os hPMs masculinos tratados com E2 produziram menos TNF-α, IL-1 e IL-6 e mais IL-23, IL-27 e GM-CSF, e os hPMs de mulheres no período fértil produziram menos TNF-α, IL-1 e produziram mais IL-10, IL-12, IL-23 e IL-27. Em comparação aos hPMs de mulheres no período menstrual, os hPMs de mulheres no período fértil produziram mais IL-12. hPMs masculinos tratados com E2 e hPMs de mulheres no período fértil expressaram menos TRL2 que hPMs masculinos. De acordo a análise da expressão gênica foi possível inferir que o E2 inibiu a via do NFκB. Com isso, conclui-se que o estrógeno atua como um imunoprotetor por modular uma ação anti-inflamatória na resposta imunológica induzida por S. aureus.

Investigar a influência dos parâmetros: intensidade e frequência semanal durante 8 semanas de exercício físico aeróbico, sobre as adaptações da defesa antioxidante e alterações funcionais e estruturais nos rins de camundongos em um modelo de Injúria Renal Aguda induzida pela cisplatina. Foram utilizados 40 camundongos Swiss machos com quatro meses de idade (16 semanas) que foram randomicamente distribuídos em cinco grupos experimentais (n = 8/grupo): 1.Sedentário, 2. (BI_3X) Treinado em baixa intensidade 3 vezes por semana, 3. (AI_3X) Treinado em alta intensidade 3 vezes por semana, 3. (BI_5X) Treinado em baixa intensidade 5 vezes por semana e (AI_5X) Treinado em alta intensidade 5 vezes por semana. Praticaram exercício físico, nado forçado, por 8 semanas e ao término do período de treinamento, foi administrado antineoplásico Cisplatina em todos os grupos experimentais para indução da Injúria Renal Aguda. Após 96 horas da administração os animais foram eutanasiados e os rins, músculos e tecidos adiposos viscerais retirados para posterior análise. Avaliou-se parâmetros de composição corporal, estrutura e função renal, marcadores de peroxidação lipídica e atividade de enzimas antioxidantes, bem como a expressão de genes envolvidos nas vias de balanço redox, inflamatória e apoptóticas. Os resultados obtidos revelaram que a frequência semanal de 3 vezes por semana promoveu melhores resultados com relação a melhora da estrutura renal, do balanço redox e dos processos apoptóticos. Observou-se que o grupo treinado em frequência 3 vezes por semana, independente da intensidade, apresentou maior massa de tecido adiposo marrom quando comparado aos demais grupos experimentais. Estruturalmente houve melhores resultados relacionados a essa mesma frequência com menor porcentagem de túbulos necróticos o que pode ter refletido numa melhora funcional com menor concentração sérica de ureia. Não houve diferença significativa na concentração sérica de creatinina entre os grupos experimentais. A peroxidação lipídica foi maior no grupo sedentário quando comparados aos grupos exercitados, independentemente da frequência e intensidade. Entretanto a atividade da catalase foi maior em todos os grupos exercitados em comparação ao grupo sedentário. O grupo treinado BI_3X apresentou
maior atividade da GPx e menor expressão gênica do NFkB e Caspase-3. Não houve diferenças significativas na expressão gênica do Nrf2 em nenhum dos grupos experimentais. Nossos dados demonstram que a frequência semanal de treinamento foi o parâmetro de maior influência sobre o balanço redox e apoptose e inflamação, na injúria renal aguda induzida pela cisplatina. O resultados indicam que o aumento da capacidade antioxidante no tecido renal atenuam o processo inflamatório e vias de sinalização de morte celular, eventos estes que constituem a fisiopatologia da injúria
renal aguda induzida pela cisplatina.