Introdução: Infecções de pele e tecidos moles são um importante problema de saúde pública mundial, tanto pela morbidade associada às suas lesões bem como por serem porta de entrada para infecções mais invasivas, que frequentemente culminam no óbito do paciente acometido. Staphylococcus aureus (S. aureus) é a principal causa desse tipo de infecção, de modo que a sua significativa adaptabilidade e o desenvolvimento de resistência são os principais fatores ligados à sua propagação e aos desafios no seu tratamento. Nesse contexto, a terapia fotodinâmica antimicrobiana (TFA) com produtos naturais tem se mostrado uma boa alternativa no combate às infecções causadas por microrganismos resistentes a antibióticos, pois agregam benefícios inerentes a esses compostos aos danos causados pelas espécies reativas de oxigênio induzidas pela TFA. A própolis verde brasileira possui efeitos conhecidos como agente antimicrobiano e imunomodulador. Contudo, não se sabe ao certo se tais atividades seriam mantidas se utilizada no contexto da TFA. Objetivos: O objetivo do presente estudo foi caracterizar a própolis verde brasileira como fotossensibilizador para TFA, avaliar os seus efeitos antimicrobianos e imunomoduladores in vivo e desenvolver microemulsão como proposta terapêutica de bioproduto para o tratamento de infecções intradérmicas causadas por bactérias resistentes a antibióticos. Materiais e Métodos: Inicialmente, foram realizados estudos in vitro para se caracterizar o potencial fotodinâmico antimicrobiano da própolis verde brasileira. Para tal, realizou-se espectrometria de absorção molecular UV-Vis para avaliar os comprimentos de onda com potencial para ativar a própolis verde. Posteriormente, cepas de referência de Staphylococcus aureus Resistente à Meticilina (MRSA ATCC 43300) e Staphylococcus aureus Intermediário à Vancomicina (VISA ATCC 700699) foram expostas a concentrações variadas de própolis verde: 1µg/mL, 5µg/mL, 10µg/mL, 50µg/mL e 100µg/mL e estimuladas por luz LED azul, verde ou vermelha. Em seguida, avaliou-se o potencial zeta das bactérias expostas à própolis verde brasileira a fim de caracterizar um possível local de ação da própolis. Logo após, cromatografia líquida de alta eficiência com detector de arranjo de diodos acoplado à espectrometria de massas em tandem, juntamente com análise clássica de redes moleculares, foram realizadas para identificar potenciais moléculas bioativas com atividade fotodinâmica. Finalmente, foram realizadas análises de citotoxicidade em eritrócitos e em células nucleadas. Após essa etapa, avaliou-se os efeitos antimicrobianos e imunomoduladores da utilização da própolis verde brasileira como fotossensibilizador contra S. aureus in vivo, em modelo de infecção intradérmica em camundongos. Nesse momento, 24 camundongos Balb/c foram infectados por via intradérmica nas orelhas com 1,5x108 unidades formadoras de colônias de MRSA 43300. Após a infecção, foram separados em 4 grupos (6 animais por grupo) e tratados com o veículo, apenas própolis verde brasileira, somente luz LED azul ou com protocolo aPDT (própolis verde brasileira + luz LED azul). Por fim, desenvolveu-se microemulsão como um sistema de entrega transdérmica da própolis verde brasileira, caracterizando-se o sistema microemulsionado e realizando os testes de estabilidade acelerada. Resultados: Observou-se que a própolis verde brasileira exibe um pico de absorção pronunciado e fotorresponsividade aumentada quando exposta à luz azul na faixa de 400nm e 450nm. Esta característica revela atividade fotodinâmica significativa contra MRSA e VISA em concentrações a partir de 5 µg/mL. Além disso, a própolis compreende compostos como a curcumina e outros flavonóides provenientes da flavona, que possuem potencial para atividade fotodinâmica e outras funções antimicrobianas. Os testes com potencial zeta não apresentaram diferenças significativas quando as bactérias foram expostas à própolis verde brasileira, o que sugere potencial internalização do composto pelas bactérias. Além disso, a própolis verde brasileira não apresentou toxicidade em eritrócitos e células nucleadas. In vivo, a TFA com própolis verde brasileira reduziu a carga bacteriana no local da infecção. Também foi capaz de inibir a perda de peso decorrente da infecção, bem como modular a resposta inflamatória através de maior recrutamento de células neutrófilos para o tecido infectado. Finalmente, a TFA induziu aumento das citocinas IL-17A e IL-12p70 no linfonodo retromaxilar drenante. Por fim, a microemulsão com própolis verde brasileira apresentou tamanho de partícula, índice de polidispersividade e potencial zeta promissores, além de possuir estabilidade, verificada nos testes de estabilidade preliminares, sendo mantida a atividade fotodinâmica antimicrobiana induzida por luz azul. Conclusões: A própolis verde brasileira apresenta atividade fotodinâmica quando estimulada por luz LED azul, sendo capaz de induzir a morte de diferentes cepas de S. aureus in vitro, mas também por reduzir a carga bacteriana e modular a resposta inflamatória em modelo murino de infecção intradérmica. Além disso, o desenvolvimento de uma microemulsão com a própolis verde brasileira mostra-se promissor, uma vez que apresenta características físico-químicas de interesse e estabilidade viabilizando o desenvolvimento de protocolos que não demandem a injeção local do fotossensibilizador, não gerando dor e incômodo, o que pode diminuir o abandono terapêutico.

Objetivos: O objetivo do estudo foi avaliar o efeito antimicrobiano da quercetina combinada com a terapia fotodinâmica antimicrobiana (TFA) e seus efeitos em camundongos infectados intradermicamente com Staphyococcus aureus resistente a meticilina (MRSA). Além disso, o estudo envolveu o desenvolvimento de uma microemulsão contendo quercetina e avaliação da eficácia antimicrobiana após a aplicação da TFA para a inativação de MRSA. Materiais e Métodos: Inicialmente, foram realizados estudos in vitro para se avaliar o potencial fotodinâmico e antimicrobiano da quercetina. Para tal, realizou-se espectrometria de varredura para avaliar os comprimentos de onda com potencial para ativar a quercetina. Posteriormente, a cepa de referência de Staphylococcus aureus Resistente à Meticilina (MRSA ATCC 43300) foi exposta a concentrações variadas de quercetina: 100µg/mL, 300µg/mL, 400µg/mL e 500µg/mL e foram estimuladas por luz LED azul. Em seguida, avaliou-se a produção de oxigênio singlete e o potencial zeta das bactérias expostas à quercetina a fim de caracterizar um possível local de ação da quercetina nas bactérias. Finalmente, foram realizadas análises de citotoxicidade em células nucleadas HUVEC. Após essa etapa, avaliou-se os efeitos antimicrobianos da quercetina como fotossensibilizador contra S. aureus in vivo, em modelo de infecção intradérmica em camundongos por 72 horas e durante 17 dias. Nesse momento, 48 camundongos Balb/c foram infectados por via intradérmica nas orelhas com 1,5x10⁸ unidades formadoras de colônias de MRSA 43300. Após a infecção, foram separados em 4 grupos (12 animais por grupo) e tratados com o veículo, apenas quercetina, somente luz LED azul ou com protocolo aPDT (quercetina + luz LED azul). Por fim, desenvolveu-se microemulsão como um sistema de entrega transdérmica da quercetina, caracterizando-se o sistema microemulsionado e realizando os testes de estabilidade acelerada e avaliação antimicrobiana frente a cepa de MRSA 43300. Resultados: A análise da espectrofotometria de varredura apresentou um pico de absorção pronunciado quando exposta à luz azul na faixa próxima de 400nm. Esta característica permitiu a condução dos testes in vitro e revelou atividade fotodinâmica significativa contra MRSA em concentrações a partir de 100 µg/mL. O composto apresentou indicativo de produção de oxigênio singlete pelo decaimento da absorção do ácido úrico, bem como indicativo de ação na parede celular bacteriana, pelo teste do potencial zeta. Além disso, a quercetina não apresentou toxicidade em células HUVEC sem e após fotoativação. Somado a isso, observou-se in vivo a que TFA com a quercetina reduziu a carga bacteriana no linfonodo drenante após 72 horas. Apesar da sua eficácia em reduzir a carga bacteriana no linfonodo, a área de lesão foi maior nos grupos tratados com a quercetina e com maior recrutamento de células polimorfonucleadas após 17 dias da infecção. Os animais que receberam o tratamento com a quercetina apresentaram uma imunomodulação com forte interação do TNF-α e IL-12p70. Por fim, a microemulsão com a quercetina apresentou aspecto líquido translúcido e valores de tamanho de gotícula, índice de polidispersividade e potencial zeta característicos de microemulsão, além de possuir estabilidade após 90 dias, em condições de estresse, e atividade inibitória do crescimento bacteriano quando fotoativada por luz LED azul. Conclusões: A quercetina mostra-se promissora como fotossensibilizante na Terapia Fotodinâmica Antimicrobiana (TFA), demonstrando atividade fotodinâmica eficaz quando ativada por luz LED azul e induzindo a morte de Staphylococcus aureus tanto in vitro quanto in vivo em um modelo murino de infecção intradérmica. Além disso, o desenvolvimento de um sistema microemulsionado contendo quercetina também se destaca devido às suas características físico-químicas favoráveis, estabilidade a longo prazo e atividade antimicrobiana eficaz contra MRSA. Esse sistema oferece a possibilidade de desenvolver protocolos terapêuticos sem a necessidade de injeção local do fotossensibilizante, reduzindo a dor e o desconforto associados e, assim, potencialmente diminuindo o abandono do tratamento.

O estudo de plantas medicinais estabelece interdependência entre a química e a medicina, impulsionando o desenvolvimento de novos medicamentos. Esse campo de pesquisa é particularmente relevante em países com alta biodiversidade, como o Brasil, que apresenta escassos estudos científicos que comprovam a eficácia e a segurança desses recursos naturais. Nesse contexto, a planta Ctenodon martii, coletada na Floresta Nacional Contendas do Sincorá, na Bahia, mostrou em estudos prévios “in vivo” ação antinociceptiva e anti-inflamatória, o que reforça sua relevância como objeto de investigação científica. Dando continuidade a essas descobertas, o presente estudo buscou avaliar, as atividades anti-inflamatória, antinociceptiva, sedativa, cicatrizante e o potencial toxicológico do extrato etanólico, bem como de frações e subfrações de diclorometano obtidas do caule/casca de C. martii, ampliando o entendimento sobre suas propriedades bioativas. Extrato etanólico do caule/casca da planta foi particionado originando a fração de diclorometano, que por técnica de cromatografia em sílica originou as subfrações D1, D2, D3, D4 e D5. Posteriormente, a subfração D2 foi submetida a um novo subfracionamento, utilizando cromatografia em coluna de Sephadex, originando D2SS.1, D2SS.2 e D2SS.3. Perfis fitoquímicos e cromatográficos dos compostos fracionados foram avaliados por CG-EM. Os resultados obtidos tiveram suas variáveis testadas quanto à distribuição normal e variância homogênea, os valores foram considerados significantes quando apresentaram p < 0,05. Para os bioensaios com as subfrações e sub-subfrações na dose de 25 mg/kg, utilizou camundongos machos Balb/c. As atividades antinociceptiva em comparação ao grupo controle veículo, foram observadas em D2, D3, D4, D5, D2SS1, D2SS.2 e D2SS.3 no teste de contorção abdominal por ácido acético; em formalina na 1º fase por D2, D3, D2SS.2 e D2SS.3, e na 2º fase D2, D3, D4, D2SS.2 e D2SS.3; no teste Von Frey houve hipernocicepção em D2, D3, D2SS.1, D2SS.2 e D2SS.3. Quanto à atividade antiinflamatória em comparação ao controle veículo foram observadas, no edema da pata em D2, D3, D2SS.2 e D2SS.3; recrutamento de neutrófilos em D2, D3, D4, D2SS.1, D2SS.2 e D2SS.3; produção de óxido nítrico e no extravasamento vascular em D2, D3 e D4. Subfrações D2 e D3 reduziram produção de citocinas TNF-α e IL1α detectados por ELISA e expressão de TNF-α, IL-6 e IL-17 determinado por qPCR. Ao avaliar a inflamação crônica, ratos Wistar, foram testados com extrato etanólico e comparado ao controle do veículo, houve redução na formação de granulomas e exsudato nas doses de 25 e 50 mg/kg; área da ferida excisional diminuída nas doses de 25 e 12,5 mg/kg, apoiando achados histológicos. No teste do labirinto em cruz elevada, não houve efeitos sedativos ou déficit locomotor. O potencial toxicológico por DL50, acompanhados por ensaios hematológicos e bioquímicos não indicaram toxicidade e letalidade. Esses resultados revelam que Ctenodon martii é uma fonte promissora para o isolamento de novos compostos bioativos e agentes terapêuticos, com potencial para uso fitoterápico. 

Aborto é a interrupção da gestação antes da 22ª semana gestacional, ou o feto pesando menos de 500g. Podendo ser de maneira habitual ou induzida, possuindo uma multicausalidade, que englobam infecções genitais. As infecções do trato genital ascendem para cavidade uterina sendo responsável por 15% dos abortos precoces e 66% nos abortos tardios. As respostas inflamatórias exacerbadas oriundas do processo infeccioso acometem a homeostase gestacional, contribuindo com o perfil pró-inflamatório e modificando o estado oxidativo. Este trabalho teve como objetivo principal avaliar os marcadores de estresse oxidativo no contexto do aborto espontâneo associado as infecções por microrganismos de importância ginecológica. Foram utilizadas amostras biológicas de tecido placentário de mulheres que evoluíram com aborto espontâneo e mulheres que tiveram parto a termo. Ao avaliar as enzimas do estresse oxidativo, foram identificados níveis elevados de marcadores da peroxidação lipídica (TBARS e proteína carbonilada) no grupo aborto, bem como o aumento da atividade antioxidante pela CAT, e redução da atividade da GPx, além de uma resposta não alterada da SOD. Entretanto, o perfil da peroxidação lipídica foi acentuado no grupo aborto infectado por UP. E os níveis da GPx foram reduzidos no grupo aborto infectado por UP, comparado ao controle infectado, enquanto SOD e CAT não apresentaram diferenças; a razão SOD/CAT esteve reduzida e SOD/GPx elevada nos grupos de UP, comparado aos sem infecção. Na razão da expressão gênica, o aborto contribuiu com a elevação de Mn SOD/GPx e infecção de UP reduziu a expressão de CuZn SOD/GPx e Mn SOD/GPx no grupo aborto e controle infectado, comparado aos grupos sem infecção. Em seguida, houve aumento dos níveis de nitrito no grupo aborto infectado por UP. Este trabalho demonstrou que a infecção por UP pode contribuir para alterar o perfil oxidante, sugerindo, assim, que o desequilíbrio do estresse oxidativo pode contribuir com a ocorrência do aborto espontâneo associado a infecção bacteriana.

As Infecções Sexualmente Transmissíveis (IST) são definidas como um grupo de doenças causadas por microrganismos transmitidos principalmente através do contato sexual sem o uso de preservativo. Além do HIV, outras IST bacterianas são consideradas epidêmicas no Brasil, destacando-se a gonorreia (Neisseria gonorrhoeae), infecções por micoplasmas (Mycoplasma genitalium, Mycoplasma hominis, Ureaplasma urealyticum, Ureaplasma parvum) e por Chlamydia trachomatis. Durante a infecção por IST células imunológicas produzem uma série de mediadores químicos como: fator de necrose tumoral alfa (TNF-α), interleucinas IL1-β, IL-6, IL-10, dentre outros, que atuam orquestrando a resposta imunológica. Objetivo: definir a assinatura de em jovens homens que fazem sexo com homens e mulheres transsexuais, correlacionando os resultados com a prevalência de IST por Neisseria gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis e Mycoplasmas. Metodologia: Trata-se de um estudo de corte transversal que faz parte de um projeto piloto intitulado “Estudo PrEP 15-19” (Título: Estudo da efetividade da Profilaxia Pré-Exposição [PrEP]. Foram coletadas amostras clínicas em duplicata de cada participante, no momento da primeira visita ao serviço. Para isso, foram obtidas por fricção de swab na  mucosa uretral peniana, oral e anal, sendo armazenadas em 5 mL de meio de transporte. A quantificação dos microrganismos foi realizada por meio de técnica de quantificação absoluta. As dosagens das citocinas IL-1β, IL-6, IL-10 e fator de necrose tumoral TNF-α foram realizadas utilizando-se kit de ELISA eBioscience. Resultados: Nossa amostra foi composta predominantemente por homens que fazem sexo com homens, pretos ou pardos, com idade entre 18 e 19 anos. Destes, 17,36% apresentaram uma ou mais infecções. Houve associação entre ensino médio completo com IST (p 0,045). Dentre as IST estudadas destaca-se a prevalência de 85,3% de micoplasmas. Na avaliação do perfil de citocinas secretados entre infectados e não infectados não encontramos associação estatisticamente significativa. Testes de matriz foram realizados entre os infectados com associação entre maiores valores de TNF-α e IL-6. Na população de não infectados, observa-se associação de maneira geral entre as citocinas, ou seja, os participantes com níveis menores apresentaram redução de todas as citocinas estudadas. Neste estudo tivemos a prevalência de 4,73% de coinfecções, todas com pelo menos um micoplasma. 50% das coinfecções encontrada foram do gênero Mycoplasma hominis e Ureaplasma urealyticum. Na avaliação da assinatura de citocinas entre mono e coinfectados e encontramos maiores níveis de IL-1β em indivíduos monoinfectados quando comparados aos co-infectados e de TNF-α nos monoinfectados, quando comparados com não infectados e coinfectados. Na observação do heatmap com clusters não supervisionado notam-se dois grupos, um com maior potencial inflamatório,e outro com menor potencial, com destaque para M. hominis e U. urealyticum  com alto potencial de resposta inflamatória.  Na Análise Principal Component fica evidenciada a associação entre infecção por M. hominis e secreção de IL1-β. Conclusão: Nosso estudo não encontrou diferença estatística entre jovens infectados e não infectados, entretanto, a infecção por micoplasma e a coinfecção por gonorreia e clamidia demonstram associação com o aumento de citocinas.

Introdução: A obesidade é caracterizada como uma condição crônica e complexa, que contribui para impactos negativos na saúde humana. Em sua gênese atuam fatores genéticos, ambientais, metabólicos e comportamentais que podem determinar redução na qualidade de vida, predispondo a alterações metabólicas e cardovasculares . Diante dessa problemática, o exercício físico é uma importante estratégia para redução da adiposidade corporal e prevenção de distúrbios cardiovasculares associados à obesidade. Objetivo: Avaliar o impacto do treinamento físico nas alterações do perfil oxidativo e nos parâmetros morfofuncionais cardiovasculares em modelo animal de obesidade induzida por dieta hipercalórica. Métodos: Foram utilizados 24 ratos Wistar machos com peso entre 150 e 200g, cujo protocolo deste estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética no Uso de Animais (CEUA/IMS-UFBA) sob parecer número 053/2017. Inicialmente, os animais experimentais foram submetidos a dieta controle normocalórica (DC, n=10) ou dieta hipercalórica (DH, n=14) para indução da obesidade durante 8 semanas. Após esse período, os animais do grupo dieta controle (DC) ou do grupo dieta hipercalórica (DH) foram subdivididos em 2 grupos experimentais cada, os quais foram treinados em esteira motorizada (DCT, n=5; DHT, n=7) ou mantidos sedentários (DCS, n=5; DHS, n=7) por 12 semanas. Ao final do experimento, os depósitos de tecido adiposo abdominal foram dissecados e pesados e o ventrículo e a aorta removidos para análise histológica e de estresse oxidativo. Sangue torácico coletado para análises bioquímicas e hormonais. Os cortes histológicos foram corados com Hematoxilina-Eosina (HE) e Tricrômio de Masson (TM) e analisados pelo sistema informatizado (ImageJ). Resultados: O consumo da dieta hipercalórica determinou aumento do consumo alimentar e calórico, do peso e da adiposidade corporal, alterou a tolerância a glicose. O protocolo treinamento aplicado reduziu o peso corporal, índice de adiposidade e os tecido adiposo abdominais dos animais submetidos à dieta hipercalórica. Não foram observados alterações significativas sobre a glicemia de jejum, insulina, HOMA-IR, HOMA-b e QUICK. A pressão arterial sistólica aumentou nos animais sedentários que consumiram a dieta hipercalórica e foi reduzida pelo protocolo de treinamento físico aproximadamente em 12%. Os níveis de CK/MB foram reduzidos em animais treinados em comparação com animais sedentários submetidos a uma dieta hipercalórica. Os animais submetidos a dieta hipercalórica apresentaram maiores áreas na espessura da túnica íntima da aorta, consequentemente, esses animais tiveram menores lúmens aórticos; enquanto os animais treinados apresentaram menores espessuras e maiores lúmens. As áreas dos cardiomiócitos e a capilarização demonstraram adaptações cardíacas patológicas nos animais sedentários que consumiram dieta hipercalórica, enquanto nos animais treinados notou-se adaptações cardíacas fisiológicas com aumento de cardiomiócitos e de neocapilarização. Os animais sedentários submetidos a dieta hipercalórica apresentaram maiores áreas com fibrose enquanto protocolo de treinamento reduziu essas áreas. O treinamento aplicado neste estudo aumentou os valores de catalase e GPX; enquanto os valores de peroxidação lipídica (TBARS) foram reduzidos nos animais treinados. Os níveis de nitritos totais cardíaco foram maiores no grupo (DHS) e nos grupos treinados independente da dieta. Conclusão: O protocolo de treinamento determinou melhora na adiposidade corporal, e parâmetros morfofuncionais e oxidativos cardiovasculares no modelo animal de obesidade induzida por dieta.

Objetivo: Investigar os efeitos do treinamento físico aeróbico realizado terapeuticamente ou ao longo da vida sobre alterações histológicas, no balanço redox, inflamação, e metabolismo no músculo esquelético e  ventrículo cardíaco provocadas pela associação entre envelhecimento e obesidade in vivo e in vitro. 

Métodos: O experimento foi dividido em estudo piloto e estudo principal. O estudo piloto buscou identificar a idade em que as alterações musculares e de performance física se iniciam em resposta ao envelhecimento natural. Dessa forma, 41 ratos Wistar machos com 4 meses de idade foram distribuídos aleatoriamente em 6 grupos definidos pela idade à eutanásia, sendo estes 4 (n = 5), 8 (n = 5), 12 (n = 7), 14 (n = 8), 18 (n = 8) e 20 meses (n = 8). Ao longo do protocolo experimental, os animais foram pesados semanalmente, e a performance física avaliada mensalmente através do teste de corrida máximo em esteira motorizada para ratos. Após a definição da idade na qual o declínio muscular se iniciou (14 meses), foi avaliada a influência do treinamento físico sobre as alterações observadas. Para tal, 32 ratos Wistar machos com 4 meses de idade foram distribuídos aleatoriamente em dois grupos: grupo sedentário (n = 16) e grupo treinado (n = 16). Ao completarem 8 meses de idade, 8 animais de cada grupo foram eutanasiados, formando os grupos jovens sedentário e treinado. Os demais animais seguiram até completarem 14 meses de idade, e constituíram os grupos envelhecidos sedentário e treinado. O treinamento foi realizado em esteira motorizada para ratos, a moderada intensidade, em dias alternados e duração de 1h por sessão. Os animais foram eutanasiados 24h após a última sessão de treinamento. Foram coletadas amostras de sangue, tecidos adiposos e músculos, que foram devidamente mensurados e armazenados em ultra freezer -80 °C, ou fixados. As amostras congeladas foram utilizadas para quantificação dos perfis inflamatório e oxidativo, e as amostras fixadas para estudos histológicos. O estudo principal constitui-se de um estudo in vivo e outro in vitro. O protocolo in vivo foi realizado com 32 ratos Wistar machos que foram distribuídos aleatoriamente em quatro grupos (n = 8/grupo): grupo envelhecido sedentário (ESed), envelhecido sedentário alimentado com dieta hiperlipídica (DHL) (ESed+DHL), envelhecido treinado terapeuticamente e alimentado com DHL (ETT+DHL) e envelhecido treinado ao longo da vida e alimentado com DHL (ETL+DHL). Após 24h da última sessão de treinamento físico, todos os animais foram eutanasiados e em seguida foram coletados o músculo gastrocnêmio e ventrículo cardíaco para estudos histológicos, imuno-histoquímicos, do balanço redox, inflamação e metabolismo. O músculo gastrocnêmio foi utilizado para análise da expressão de mRNA e microRNA por qPCR. Os depósitos de tecidos adiposos abdominais foram coletados e pesados pera determinação da composição corporal. Para os estudos in vitro, foram utilizados macrófagos primários obtidos do exsudato peritoneal de 6 camundongos BALB/c machos com 4 meses de idade, elicitados através da administração de tioglicolato (3% via IP), e mioblastos primários isolados do músculo gastrocnêmio de um rato Wistar macho com 4 meses de idade. As culturas de macrófagos e mioblastos foram expostas ao soro dos animais do estudo in vivo durante 24h. As culturas foram usadas para análise da viabilidade celular por MTT, dosagem de nitritos totais e peróxido de hidrogênio e análise da expressão de genes envolvidos na resposta inflamatória e metabolismo muscular. Todas as variáveis de interesse deste estudo foram submetidas ao teste de normalidade Shapiro-Wilk. As comparações entre grupos do teste piloto foram feitas com o teste ANOVA para medidas repetidas (análise temporal) e ANOVA one-way, seguida pelo pós-teste de Tukey. Para as análises entre grupos jovens e envelhecidos, sedentários e treinados, foi adotado delineamento fatorial (2x2) utilizando o teste ANOVA two-way. As análises dos estudos in vivo e in vitro foram feitas através dos testes T de Student e ANOVA one-way.

Resultados: Os resultados do estudo piloto indicam que o declínio da função muscular se inicia aos 14 meses de idade, evidenciado pela redução da performance física, peso da massa magra e do músculo gastrocnêmio e capacidade antioxidante do músculo. Por outro lado, a rotina de treinamento físico até os 14 meses melhorou
a composição corporal, perfil inflamatório, status redox e protegeu o músculo contra redução da área seccional das fibras. Os resultados do estudo in vivo evidenciaram um desfecho desfavorável em resposta à associação entre envelhecimento e obesidade induzida por dieta sobre os parâmetros musculares e cardíacos morfologia, fibrose, inflamação, estresse oxidativo e metabolismo. Além disso, foi observado no
músculo gastrocnêmio o aumento da expressão do miRNA-21 e genes envolvidos na resposta pró-inflamatória e catabólica, e redução da expressão de genes envolvidos na resposta anti-inflamatória, antioxidante e anabólica. O treinamento físico, em especial o protocolo de treinamento ao longo da vida, atenuou os achados decorrentes da associação entre envelhecimento e obesidade sobre os parâmetros musculares e cardíacos, reduziu a expressão do miR-21 e aumentou a expressão do miR-486. Nos estudos in vitro, os macrófagos e mioblastos expostos ao soro dos animais envelhecidos e obesos apresentaram aumento do perfil pró-inflamatório e catabólico, respectivamente, ao passo que o soro dos animais treinados, especialmente aqueles que realizaram o treinamento ao longo da vida, determinou redução do perfil próinflamatório e catabólico das culturas celulares.

Conclusão: No modelo animal estudado, a associação entre sedentarismo, envelhecimento e obesidade induzida por dieta hiperlipídica determinou prejuízos musculares especialmente nos perfis inflamatório, oxidativo e metabólico. Em contrapartida, a prática regular de exercício físico, especialmente ao longo de toda a vida, atenuou as alterações provocadas pela associação entre envelhecimento e obesidade em todos os parâmetros estudados, in vivo e in vitro. Nossos achados reforçam a superioridade do protocolo de treinamento ao longo da vida como ferramenta eficaz contra os efeitos da idade, mesmo quando associado à hábitos alimentares não saudáveis.

INTRODUÇÃO/OBJETIVO: O envelhecimento em mulheres está associado as alterações decorrentes do climatério, que culmina em modificações na composição corporal, alterações metabólicas e hormonais, que apresentam maior susceptibilidade ao desenvolvimento de doenças crônicas não transmissíveis (DCNT). Dentre os agravos crônicos de maior incidência nesta população, o diabetes mellitus (DM) e a hipertensão arterial sistêmica (HAS) se destacam. Essas doenças, apesar dos diferentes órgãos e sistemas envolvidos, têm um fator de risco comum: em geral, inflamação clinicamente silenciosa de baixo grau que contribui para a patogênese e progressão de doenças relacionadas à idade. Portanto, este trabalho teve como finalidade o estudo ampliado sobre as interações dos parâmetros antropométricos, bioquímicos e inflamatórios associados ao risco na gravidade dessas doenças em mulheres idosas na pós-menopausa. MÉTODOS: O estudo envolveu a avaliação de 126 mulheres idosas, tendo diagnóstico positivo de hipertensão arterial e diabetes mellitus. Os grupos foram divididos em riscos proposto pela Sociedade Europeia de Cardiologia. Dados antropométricos foram coletados com a análise de bioimpedância, enquanto os dados inflamatórios e bioquímicos foram realizados a partir da coleta sanguínea. Os soros obtidos foram avaliados por ensaios enzimáticos. As análises estatísticas foram realizadas através do GraphPad Prism, e as correlações foram analisadas através do software R Studio. RESULTADOS: A circunferência da cintura e a razão circunferência da cintura/altura foram maiores no grupo risco muito grave quando comparado ao grupo de risco leve. A massa magra (p< 0,011) diminui com o aumento do risco de gravidade. As pressões sistólica (p< 0,0002) e diastólica (p< 0,0054) aumentaram em paralelo com o aumento da gravidade em relação aos grupos. Os marcadores bioquímicos aumentaram com o risco de gravidade: glicose, 7 triglicerídeos, colesterol, LDLc e VLDLc, exceto o HDLc. Com relação aos dados inflamatórios foi possível observar que as citocinas inflamatórias IL-1β, IFN-γ, TNF-α aumentaram em conjunto com a gravidade. Entretanto, a citocina antiinflamatória IL-10 (p=0,0293) diminuiu no grupo de risco muito grave. As razões entre as citocinas mostraram padrões diferentes entre os grupos. O grupo de idosas de risco muito grave apresentou menores valores para as razões IL-10/IL1β (p< 0,05), IL-10/IL-17 (p< 0,05) e IL-10/TNF-ɑ (p< 0,01) quando comparado com as idosas de risco grave. Os padrões de correlações paras as variáveis bioquímicas, inflamatórias e de composição corporal são distintas entre os grupos. Entretanto, o grupo de risco muito grave, observa menores forças de correlação de alguns parâmetros e o surgimento de outras interações. CONCLUSÃO: Os resultados mostraram ser extensamente alterados no grupo de risco muito grave, onde o perfil inflamatório perde sua responsividade à medida que aumenta a gravidade. Este é o primeiro trabalho que mostra uma visão ampliada da complexa interação entre os diferentes parâmetros avaliados em mulheres idosas hipertensas e diabéticas.

Objetivo: Avaliar os efeitos das dietas hiperlipídicas com óleos de coco ou de linhaça restritas em carboidratos ou do exercício de moderada intensidade sobre parâmetros metabólicos e hepáticos em ratos obesos. Métodos: Foram utilizados 54 ratos machos Wistar que inicialmente receberam as dietas controle (n=6) ou hipercalórica (n=48) para indução da obesidade por 8 semanas. Após este período, os animais do grupo controle (n=6) e parte do grupo hipercalórica (n=6) foram eutanasiados e os demais foram subdivididos em seis grupos, com diferentes dietas e submetidos ou não ao exercício físico de moderada intensidade por 12 semanas: hipercalórica e sedentários (n=7); hipercalórica e exercitados (n=7); hiperlipídica com óleo de coco restrita em
carboidratos e sedentários (n=7); hiperlipídica com óleo de coco restrita em carboidratos e exercitados (n=7), hiperlipídica com óleo de linhaça restrita em carboidratos e sedentários (n=7) e hiperlipídica com óleo de linhaça restrita em carboidratos e exercitados (n=7). Avaliou-se parâmetros dietéticos, cardiovasculares e de composição corporal, o perfil lipídico e inflamatório plasmático, a homeostase glicêmica, a resistência e sensibilidade à insulina. Além disso, avaliou-se o desenvolvimento de esteatose, inflamação, fibrose e
estresse oxidativo no fígado. Resultados: O modelo experimental de obesidade induzida por dieta foi validado. A dieta hiperlipídica com óleo de coco restrita em carboidratos reduziu o consumo alimentar e calórico, mas
aumentou a adiposidade corporal, os níveis pressóricos, glicêmicos e insulínicos, reduziu os níveis de IL-10, aumentou o colesterol no fígado, promoveu deposição macrovesicular de gordura inflamação, fibrose e estresse
oxidativo no tecido hepático. A dieta hiperlipídica com óleo de linhaça restrita em carboidratos, embora tenha aumentado a ingestão calórica, não aumentou a massa e a adiposidade corporal, melhorou o perfil lipídico, reduziu os níveis de IL6 e IL-10, o estresse oxidativo e a deposição de macro e microvesículas
de gordura no fígado, no entanto, promoveu inflamação hepática e hiperglicemia. O exercício promoveu efeitos benéficos sobre a maioria dos parâmetros metabólicos e hepáticos. Conclusão: O consumo da dieta hiperlipídica com óleo de coco restrita em carboidratos impactou negativamente a adiposidade corporal e os perfis metabólicos e inflamatórios sistêmico e hepático, enquanto que o consumo da dieta hiperlipídica com óleo de linhaça restrita em carboidratos e o exercício promoveram efeitos benéficos sobre a maioria dos parâmetros metabólicos e hepáticos analisados. Desta forma, sugere-se cautela na utilização destas dietas, mesmo quando associadas ao exercício, reforçando a necessidade da realização de mais estudos para determinar as recomendações seguras de inclusão desses óleos na dieta.

Introdução: As infecções por Staphylococcus aureus apresentam uma taxa de morbidade e mortalidade elevada, considerado um grande problema para a saúde pública. Existem poucas informações na literatura sobre o papel da dihidrotestosterona nas infecções causadas por S. aureus. O objetivo: Avaliar a influência da 5α-dihidrotestosterona (DHT) sobre a resposta de macrófagos peritoneais murinos (MPMs) e monócitos humanos do sangue periférico (hPMs) na resposta imunológica induzida por Staphylococcus aureus. Metodologia: Foi realizado um modelo in vitro oriundo de MPMs machos BALB/C Shams, orquiectomizados (OQX) e fêmeas e de hPBMs de homens e mulheres jovens em idade fértil, saudáveis, com níveis de esteroides sexuais dentro da faixa de normalidade. As células foram inoculadas com 10μl de S. aureus capa 80 ou com salina estéril (controle) por um período de 6h. As células dos machos OQX, fêmeas e dos hPBMs homens e mulheres também foram pré-tratadas com a concentração de 100μl (10^-2M) de DHT por 24h antes da estimulação com S. aureus. As citocinas TNF-α, IL-1α, IL-1β, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12, GM-CSF, os nitritos totais, peróxido de hidrogênio (H₂O₂)  foram mensurados em sobrenadante de cultura em MPMs e em hPBMs. Além disso, foi realizada a análise de 84 genes, por RT-PCR array, envolvidos na resposta imune contra S. aureus. Resultados: Em MPMs, as células inoculadas com S. aureus dos machos Sham apresentaram níveis mais elevados das citocinas inflamatórias e menores concentrações de IL-10, nitritos totais e H₂O₂ em comparação aos OQX. As células dos machos Sham inoculadas com S. aureus também apresentaram maiores concentrações de citocinas pró-inflamatórias e menores concentrações de IL-10, nitritos totais e H₂O₂ em relação as fêmeas. No tratamento com o DHT, a concentração de citocinas inflamatórias e a expressão de genes como TLR-2 e genes envolvidos pela via do NF-kB foram maiores nos OQX tratados com o hormônio em comparação aos OQX sem o pré-tratamento. Além disso, as concentrações de nitritos totais e H₂O₂ foram menores em células com o pré-tratamento, tanto em células dos machos OQX, quanto em fêmeas. Para o experimento com seres humanos, todos os sujeitos da pesquisa selecionados estavam saudáveis e os níveis dos hormônios sexuais estavam dentro dos padrões de normalidade para homens e mulheres em idade fértil (17β-estradiol, progesterona, hormônios folículo estimulante (FSH), luteinizante (LH) e testosterona). Os hPBMs inoculados com S. aureus de homens apresentaram maiores concentrações de citocinas inflamatórias e menores concentrações de IL-10, menores níveis de nitritos totais e H₂O₂ em comparação as mulheres. Em resposta ao tratamento, com o DHT, o hormônio inibiu as concentrações de nitritos totais e H₂O₂ tanto em homens quanto em mulheres e apresentaram maior expressão de TLR-2 e genes envolvidos pela via do NF-kB, corroborando com os resultados em murinos. Conclusão: Nossos resultados demonstraram que existe diferença entre os sexos na resposta a inoculação por S. aureus e que o DHT apresenta propriedades imunomoduladoras pró-inflamatórias em MPMs e em hPBMs. O hormônio estimulou maior liberação de citocinas inflamatórias, genes envolvidos nessa resposta e suprimiu a liberação de marcadores inflamatórios importantes para a fagocitose contra S. aureus. Em relação ao sexo, as fêmeas desempenharam uma melhor resposta de defesa imune contra esse patógeno.Este trabalho traz uma abordagem não apresentada na literatura, com dados sobre a atuação do DHT na resposta inflamatória contra S. aureus, podendo estes serem considerados resultados importantes para gerar novos estudos na área sobre os andrógenos e seu papel na resposta contra microrganismos, que é de grande interesse científico.

Objetivo: Avaliar os efeitos da dieta cetogênica hiperproteica sobre parâmetros relacionados à homeostase glicêmica e alterações hepatorrenais em ratos Wistar obesos submetidos ou não ao exercício. Métodos: Foram utilizados 40 ratos machos Wistar, pesando entre 150 e 200g que inicialmente receberam as dietas controle (n=6) ou hipercalórica (n=34) para indução da obesidade por 8 semanas. Após este período, os animais do grupo controle (n=6) e parte do grupo hipercalórica (n=6) foram eutanasiados, sendo os animais obesos remanescentes subdivididos em quatro grupos, recebendo dietas e submetidos ou não ao exercício físico de moderada intensidade por 12 semanas: hipercalórica e sedentários (n=7); hipercalórica e exercitados (n=7); cetogênica hiperproteica e sedentários (n=7); e cetogênica hiperproteica e exercitados (n=7). Ingestão alimentar, parâmetros de composição e adiposidade corporal, pressão arterial, perfil bioquímico e inflamatório sérico, homeostase glicêmica, resistência e sensibilidade à insulina foram avaliados. Além disso, avaliou-se a expressão de IR, AMPK, Akt, GSK3β e GLUT4 no músculo, a função renal e hepática, o perfil morfométrico, inflamatório e oxidativo dos rins, a deposição de gordura no fígado, a morfologia, o estresse oxidativo e a imunomarcação de insulina e glucagon no pâncreas. Resultados: O modelo de obesidade induzida por dieta foi validado. O tratamento da obesidade com a dieta cetogênica hiperproteica e/ou com o exercício por 12 semanas determinou redução da ingestão alimentar e calórica, do ganho de massa corporal e da adiposidade. Apesar do aumento na glicemia, a combinação da dieta e exercício reduziu insulina sérica, e atenuou os indicadores de resistência periférica. O exercício isolado aumentou expressão de glucagon e reduziu insulina no pâncreas, aumentou expressão do IR, GLUT4 e GSK3β no músculo. A dieta e o exercício alteraram os indicadores de inflamação sistêmica, o perfil lipídico sérico e os marcadores de função hepática, além de reduzirem a deposição macrovesicular de lipídios no fígado, melhorarem o perfil oxidativo no pâncreas e atenuarem a peroxidação lipídica no rim. A dieta cetogênica hiperproteica, por si só, promoveu alterações na função e inflamação renal, sem, induzir modificações estruturais significativas. Conclusão: A dieta cetogênica hiperproteica associada ou não ao exercício por 12 semanas teve impacto positivo sobre a redução da massa e adiposidade corporais e deposição de gordura no fígado, mas não permitiu constatação sobre a melhora da homeostase glicêmica, da resposta insulínica e do perfil lipídico. As alterações pancreáticas e hepatorrenais pareceram discretas e insuficientes para se determinar efeitos positivos ou negativos, assim, mais investigações são requeridas, sobretudo, das vias metabólicas relacionadas. Nesse sentido, sugere-se cautela na utilização desta dieta, mesmo quando associada ao exercício, visto que algumas lacunas foram evidenciadas, especialmente no que se refere à homeostase glicêmica e ao comprometimento da função renal devido à proteinúria.

Gardnerella vaginalis é uma bactéria comensal da microbiota vaginal e o principal agente da vaginose bacteriana (VB), uma infecção vaginal estabelecida devido ao desequilíbrio nesse ecossistema. A patogênese da vaginose bacteriana não está bem estabelecida, no entanto é considerada a principal desordem vaginal que acomete mulheres em idade reprodutiva o que pode hipotetizar a influência dos hormônios sexuais femininos em sua patogênese. Objetivo: Avaliar a influência do 17β-estradiol (E2) na resposta imunológica induzida por Gardnerella vaginalis em modelos in vitro de macrófagos peritoneais murinos (MPMs) fêmeas e monócitos humanos do sangue periférico (hPMs) de mulheres, com ou sem atividade ovariana fisiológica. Metodologia: Realizado experimentos in vivo e in vitro. Para os experimentos in vivo nos animais, foram realizados: peso corporal, índice uterino e dosagem de estradiol e em humanos, foram realizados exames laboratoriais como hemograma, bioquímicos e hormonais. Para os experimentos in vitro os macrófagos peritoneais de fêmeas BALB/C cirurgia simulada (SHAM) ou ovariectomizadas (OVX) e os monócitos humanos do sangue periférico (hPMs) de mulheres em período fértil e menopausa foram subdivididos em três grupos: células inoculadas com G. vaginalis, células com salina estéril, ambas por 6 horas, e células pré-tratadas com 17β-Estradiol (E2), por 6 horas, e inoculadas com G. vaginalis, também por 6 horas. Marcadores inflamatórios como: citocinas GM-CSF, IL-1β, TNF-α, IL-6, IL-12, IL-23, IL-27 e IL-10, nitritos totais, peróxido de hidrogênio (H2O2), foram mensurados em sobrenadante de cultura e a expressão dos genes TLR-2, NF-kB e ERα e ERβ Além disso, uma curva de crescimento foi realizada em dois grupos. O grupo um, apenas com G. vaginalis e o grupo dois, G. vaginalis com 17β-estradiol, durante um período de 24 horas. Resultados: Para a análise da curva de crescimento, pode ser constatada a atividade inibitória do E2 sobre a G. vaginalis. Para os experimentos em animais: In vivo, fêmeas SHAMs apresentaram maior peso uterino e maior concentração de estradiol, enquanto fêmeas OVX apresentaram maior peso corporal. In vitro, a concentração das citocinas, IL-6, IL-8, IL-10 e os marcadores inflamatórios, nitritos totais e o peróxido de hidrogênio (H2O2), apresentaram níveis elevados em MPMs de fêmeas SHAM e OVX inoculadas com G. vaginalis quando comparados com salina estéril. Ao tratamento com E2, os MPMs das fêmeas OVX apresentaram maiores níveis de IL-10 e peróxido de hidrogênio quando com parados com OVX sem tratamento. Entretanto, apenas o peróxido de hidrogênio se equiparou aos MPMs das fêmeas SHAM. Para as expressões gênicas de TLR-2, NF-kB e ERα e ERβ resultado similar foi observado nos modelos SHAM e OVX entre infectados e salina estéril. As comparações entre as células infectadas dos modelos SHAM, OVX e OVX tratados com E2 também apresentaram maiores níveis de citocinas e marcadores inflamatórios e expressões gênicas para células do modelo SHAM, com exceção apenas para expressão do ERβ. Para os experimentos em humanos: In vivo, todos os sujeitos de pesquisa selecionados estavam saudáveis, porém foi observado maior concentração de glicose, colesterol total, LDL e TGP nas mulheres na fase de menopausa e maior concentração de leucócitos nas mulheres em período fértil. Para a dosagem sérica dos hormônios sexuais foi observado que mulheres em período fértil apresentaram maiores concentrações de 17β-estradiol e progesterona, enquanto as mulheres na menopausa, concentrações elevadas dos hormônios folículo estimulante (FSH) e luteinizante (LH). In vitro, os hPMs infectados com G. vaginalis de mulheres no período reprodutivo e na menopausa apresentaram maiores níveis de nitritos totais, H2O2 e citocinas quando comparado com salina. Entretanto, os hPMs infectados de mulheres na menopausa apresentaram maiores níveis de H2O2 em comparação com hPMs de mulheres no período reprodutivo. Em se tratando das citocinas as células tratadas com E2 não se equipararam às com E2 endógeno, exceto IL-10. Conclusão: Aos experimentos em animais e humanos, em relação à influência do E2 na resposta inflamatória aguda ao desafio, in vitro, por G. vaginalis, observa-se que o hormônio apresenta característica imunomodulatória, mas não podendo ser, exclusivamente, definida como pró ou antiinflamatória. Neste estudo, para o E2 endógeno, todas as citocinas, marcadores inflamatórios e expressões gênicas apresentaram maiores níveis, tanto em MPMs quanto para hPMs. Ao tratamento com E2, os MPMs de fêmeas OVX e hPMS de mulheres na menopausa apresentaram similaridade de resposta para os níveis de IL-10 em relação as células com E2 endógeno, indicando uma ação anti-inflamatória. Porém, os genes de reconhecimento e desencadeamento de inflamação aguda também apresentaram similaridade entre MPMs tratadas com E2 em relação às células com E2 exógeno. Influências fisiológicas, como a progesterona endógena, podem contribuir para que células apresentem características de resposta inflamatória aguda, e o tratamento de células, exclusivamente com E2, não tenha resultado em uma equiparação de resposta de células com hormônios sexuais endógenos. Entretanto, o E2 apresentou característica bacteriostática em relação a proliferação G. vaginalis, podendo este hormônio modular fatores de virulência deste microrganismo, assim, contribuindo para uma ausente ou discreta resposta imunológicas no curso da vaginose bacteriana.

As doenças crônicas não transmissíveis (DCNT) são responsáveis por cerca de 70% de todas as mortes no mundo. Neste cenário, a hipertensão arterial sistêmica (HAS) e o diabetes mellitus tipo 2 (DM2) são doenças que apresentam vários aspectos em comum. Nelas biomarcadores oferecem uma compreensão dos processos de doenças e podem beneficiar a detecção precoce, o tratamento e o seu manejo. Desse modo, o objetivo deste estudo foi avaliar as concentrações de biomarcadores inflamatórios no soro de pacientes com diferentes gravidades de DM2 e HAS bem como analisar as correlações entre interleucinas e a gravidade da doença. Inicialmente, pacientes previamente diagnosticados com DM2 e HAS foram estratificados em diferentes graus das doenças, visando detectar os fatores que mais influenciam nas complicações das doenças supracitadas. Os grupos foram divididos em baixo risco (1), risco moderado (2), risco alto (2), risco muito alto (4), de acordo com a Sociedade Europeia de Cardiologia, a qual correlaciona os valores da pressão arterial com a presença de fatores de risco. Para realização desse trabalho, voluntários foram recrutados para aferição da pressão e foi realizada análise da composição corporal através da bioimpedância. Foram coletados sangue desses pacientes para dosagens bioquímicas e para realização de ELISA, visando detectar as concentrações das citocinas IL-17, IL-1β, IFN-γ, TNF-α e IL-10 no soro. As análises estatísticas foram realizadas utilizando o teste Kruskal-Wallis, e as correlações foram analisadas através do software R Studio. Observamos que quanto maior a gravidade, maior a concentração sérica de citocinas pró-inflamatórias, entretanto, não foi observada diferença significativa entre os sexos ou período de climatério. Correlações positivas fortes foram encontradas entre IL-17, IL-1β e IFN-γ do grupo de baixo risco, entretanto, essas correlações são perdidas conforme aumenta o grupo de risco. Esses achados sugerem que a inflamação está presente contribuindo para o agravamento da HAS e DM2. Através de análises bayesianas encontramos a hiperglicemia exercendo um papel central na modulação do estado pró-inflamatório. Esse estado pode ser alterado com a prática de atividade física, confirmando o seu efeito benéfico e protetor. Este é o primeiro trabalho que mostra a complexa interação entre diferentes biomarcadores no DM2 e na HAS, principalmente a hiperglicemia como centro indutor da inflamação, e como a interação desses marcadores aumenta a gravidade das doenças.

Uma das principais alterações do diabetes mellitus tipo 1 (DM1) é a redução progressiva das células β pancreáticas, e consequentemente da produção de insulina. A peroxidação lipídica, citocinas pró-inflamatórias, e o fator de transcrição nuclear (NF-kB), desempenham papel importante na disfunção e morte de células β durante o DM1. Além disso, o fator de crescimento transformante (TGF-β1) e a fibrose participa do desenvolvimento do diabetes mellitus (DM). Já foi demonstrado os efeitos benéficos do exercício físico sobre complicações em diversos órgãos decorrentes da DM. No entanto, não há estudos que trate seus efeitos sobre ilhotas de langerhans de ratas diabéticas ovariectomizadas.  Para isso, ratas wistar foram anestesiadas e submetidas à ovariectomia bilateral. Após a recuperação cirúrgica, os animais receberam injeção de 40 mg/kg de estreptozotocina (STZ) para a indução do DM1 ou de tampão citrato 0,1M, pH 4,5, e foram divididos em quatro grupos experimentais: 6 ratas controles sedentárias OVX (CSO); 6 controles previamente treinadas OVX (CPTO); 6 diabéticas sedentárias OVX (DSO); e 6 diabéticas previamente treinadas OVX (DPTO). Os animais dos grupos DPTO e CPTO foram submetidos a quatro semanas de treinamento aeróbico previamente à indução do DM1. Após as quatro semanas foi realizada indução do DM1 nos animais dos grupos DSO e DPTO. Em seguida, os grupos CPTO e DPTO foram submetidos ao mesmo protocolo de exercício físico aeróbico regular de intensidade moderada, o qual consistiu em corrida em esteira motorizada por um período de oito semanas. O exercício físico não aumentou o conteúdo de insulina e massa de células β nas ilhotas de langerhans do grupo DPTO. Contudo, diminuiu o conteúdo de glucagon e massa de células α, mostrando o efeito benéfico do exercício sobre o hormônio contra-regulador da homeostasia da glicose no sangue.  Além disso, a glicose do sangue do das ratas DPTO foi menor que a das ratas DSO. O exercício físico também diminuiu a expressão de TGF-β1 nas ratas DPTO em relação as ratas DSO, bem como também diminuiu a fibrose nessas ilhotas. O exercício físico reduziu o estresse nitrativo pela redução da marcação para nitrotirosina no grupo DPTO. Além disso, o exercício físico exerceu efeito fundamental na redução da expressão do fator de transcrição NF-kB. Esses resultados mostram o efeito benéfico do exercício físico previamente a indução do diabetes sobre a expressão de marcadores inflamatórios e oxidativos, estrutura das ilhotas e conteúdo do hormômio contra-regulador da concentração da glicose sanguínea.

A Pimpinella anisum Lineu é utilizada para aumentar a produção de leite materno, porém de forma empírica por mães com hipogalactia, sendo que sua eficácia, segurança, dose efetiva e mecanismos de ação devem ser comprovados. Este estudo avaliou o perfil fitoquímico e a atividade galactagoga do extrato etanólico (EEPA), frações das sementes de P. anisum e do composto isolado anetol, bem como a toxicidade de EEPA. Ratas Wistar lactantes amamentando sete a oito filhotes cada, foram divididas em grupos tratadas diariamente por via intraperitoneal com (n=6): a) 0,4 ml de água destilada; b) EEPA nas doses de 12,5; 25 e 50 mg/Kg; c) FH nas doses de 12,5; 25 e 50 mg/Kg; d) FD nas doses de 12,5; 25 e 50 mg/Kg, e) FAE nas doses de 12,5; 25 e 50 mg/Kg; f) FB nas doses de 6,25; 12,5 e 25 mg/Kg e apenas o g) anetol nas doses de 12,5; 25 e 50 mg/Kg; por via oral.  Foram determinados o ganho de peso diário e total da ninhada, a estimativa da produção de leite em 1 h de amamentação, a perda de peso da rata lactante e o tempo de amamentação do 4º ao 18ª dia de vida dos filhotes. No 19º dia, as ratas foram ordenhadas para determinar o teor energético e os constituintes majoritários do leite, sendo eutanaziadas no 20º dia e removidas as glândulas mamárias para a análise histológica. No 2º experimento, as concentrações de prolactina e ocitocina foram dosadas na adenohipófise ou neurohipófise, soro e glândula mamária nas ratas no 14º e 21º dia de lactação, divididas nos seguintes grupos (n=6): a) 0,4 mL água destilada, b) EEPA (12,5 mg/Kg) e c) anetol (50 mg/Kg). Toxicidade frente à Artemia salina (12,5; 25; 50, 100 e 200 μg/mL) e toxicidade aguda com determinação de DL50 com ratos machos e fêmeas Wistar foram analisadas para os grupos (n: 3): a) etanol 10%, b) 5, 50, 300 e 2000 mg/Kg de EEPA e c) 0,4 ml água destilada. Atividade galactagoga foi observada apenas com o EEPA (12,5 mg/Kg), fração de diclorometano (25 mg/Kg) e anetol (50 mg/Kg), pois houve maior ganho de peso diário (24,8%, 11,6%, 10,2%) e total (28,1%, 11,37%, 9,7%), e estimativa de produção de leite (32,6%, 40%, 22,4%) (p < 0,05), sem alterações na perda de peso da rata lactante e no tempo de amamentação (p > 0,05) em relação ao controle. EEPA aumentou a concentração de proteínas totais e colesterol (84,7% e 185%), a FD aumentou a concentração de lactose, lipídios totais e colesterol (27,6%, 140,4% e 140%) e o anetol aumentou todos os constituintes em relação ao controle (p < 0,05). Embora as glândulas mamárias histologicamente estivessem em processo de involução, o menor número de lóbulos e alvéolos do EEPA e o menor número de alvéolos da FD e anetol indicam que estavam distendidos e a glândula estava mais ativa anteriormente. As maiores concentrações de prolactina adenohipofisária, sérica e na glândula mamária, aos 21 dias foram encontradas com EEPA e anetol (p < 0,05). Aumento da concentração de ocitocina ocorreu ao 14º dia na neurohipófise, e no soro do EEPA e apenas na neurohipófise do anetol. EEPA não apresentou toxicidade aguda nem morte dos animais. Assim, as sementes de P. anisum possuem atividade galactagoga atribuída a presença de compostos com atividade estrogênica (β-sitosterol, estigmasterol, anetol e seus polímeros) e antagonistas de dopamina (anetol) que estimulam a maior produção de prolactina, levando às alterações histológicas da glândula mamária, constituintes e quantidade de leite, refletindo no maior crescimento da ninhada. 

INTRODUÇÃO/OBJETIVO: Hipertensão arterial sistêmica (HAS) e diabetes mellitus do tipo 2 (DMT2) são importantes doenças crônicas não transmissíveis (DCNT) responsáveis por elevada mortalidade associada ao risco cardiometabólico. O envelhecimento é marcado pelo amplo espectro de modificações fisiológicas que configuram os idosos como grupo de risco para o desenvolvimento de DCNT. A terapia medicamentosa da HAS e DMT2 frequentemente é acompanhada pela prática de atividade física, e esta abordagem é associada à redução do risco cardiometabólico. Entretanto, pouco se sabe sobre a existência de perfis de benefícios terapêuticos distintos entre homens idosos e adultos hipertensos e diabéticos praticantes de atividade física. Com isso, este trabalho teve por objetivo comparar a influência da pratica atividade física entre homens adultos ou idosos, hipertensos e diabéticos, sobre parâmetros bioquímicos, antropométricos e inflamatórios relacionados a patogênese da HAS e DMT2. MÉTODOS: Neste estudo, 94 homens portadores de HAS e DMT2 foram incluídos. O trabalho contou com a aplicação de uma versão reduzida e validada do questionário internacional de atividade física (IPAQ) e do questionário de avaliação de qualidade de vida e saúde (QVS-80). Os indivíduos praticantes de atividade física foram selecionados pela prática de pelo menos 150 minutos de atividade física por semana por um período de pelo menos três meses. Indivíduos com idade igual ou superior a 60 anos foram classificados como idosos. Em seguida, foi realizada a avaliação antropométrica dos participantes, onde foram coletados dados de massa corpórea, composição corpórea, altura e circunferência de cintura. Após a sugestão de jejum de pelo menos 8h, uma amostra de sangue foi coletada de cada participante para dosagem sérica de marcadores bioquímicos (HDL, LDL, VLDL, triglicérides e glicose), inflamatórios (IL-1β, IL-17, IFN-γ, TNF-α e IL-10) e hormônios sexuais (testosterona total e estradiol. RESULTADOS: Homens adultos e idosos praticantes de atividade física apresentaram mais massas magra e óssea, bem como menor massa gorda do que indivíduos sedentários. A massa magra participou de um eixo de múltiplas correlações negativas com marcadores antropométricos, correlacionando-se negativamente com a razão entre a circunferência de cintura e estatura, massa gorda e índice de massa corporal. Em idosos praticantes de atividade física, a massa magra ainda se correlacionou negativamente com marcadores inflamatórios sistêmicos e positivamente com a IL-10 e com o estradiol sérico. Homens adultos e idosos praticantes de atividade física também apresentaram menores concentrações séricas de LDL, VLDL, triglicérides e de glicose em jejum do que indivíduos sedentários. Os idosos praticantes de atividade física exibiram menores concentrações séricas de IL-1β e TNF-α do que indivíduos de adultos sedentários, bem como menores valores para as concentrações séricas de IL-17, IL-1β, TNF-α e IFN-γ do que a sua contraparte sedentária. Neste estudo não detectamos diferenças entre as concentrações séricas de testosterona e estradiol entre os grupos. CONCLUSÃO: A prática de atividade física mostrou-se benéfica tanto para homens adultos como para homens idosos diabéticos e hipertensos, configurando, nestes, um menor risco cardiovascular associado à patogênese destas doenças. No entanto, os nossos resultados sugerem que, para homens portadores de HAS e DMT2, a prática de atividade física pode ser mais valiosa do que a idade na modulação de marcadores fisiopatológicos destas comorbidades, principalmente por participar da regulação de das concentrações séricas de marcadores da inflamação sistêmica relacionados ao risco cardiometabólico.

Evidências clínicas e experimentais apoiam a hipótese de que os esteroides sexuais regulam a resposta imunológica e, consequentemente, exercem efeitos sobre condições patológicas adversas, como as infecções bacterianas. De um modo geral, o paradigma da influência hormonal sobre a resposta imunológica estipula que o estrógeno aumenta essa resposta, enquanto que a testosterona suprime. Contudo, dados na literatura ainda são controversos. Ainda, há uma lacuna no que diz respeito ao papel do estrógeno nas infecções por bactérias Gram-positivas, como S. aureus. O objetivo deste estudo foi avaliar a influência da ovariectomia e do 17β-estradiol na resposta imunológica induzida por S. aureus em um modelo in vitro de macrófagos peritoneais murinos (MPMs) e monócitos humanos do sangue periférico (hPMs) e em um modelo in vivo. Para isso, camundongos fêmeas BALB/c foram ovariectomizadas (OVX) ou sham-operadas (Sham). No modelo animal, as fêmeas foram inoculadas intraperitonealmente com S. aureus ATCC 25923 ou salina estéril. Os animais foram eutanasiados em 7 períodos diferentes com intervalo de 24 horas cada e 10 fêmeas (n = 5 Sham/n = 5 OVX) foram agrupadas para cada período. Após a eutanásia, amostras de sangue foram coletadas para contagem total e diferencial de leucócitos e quantificação de S. aureus por RT-PCR. O útero e o baço foram removidos e pesados. O soro foi destinado para avaliação dos níveis de estradiol. Os pulmões foram removidos e fracionados para realização da análise imuno-histoquímica para detecção de macrófagos (anti-CD68) e expressão gênica relativa de IL-6, IL-1β e TNF-α por RT-PCR. Os resultados mostraram que fêmeas OVX apresentaram esplenomegalia e resposta tardia de monócitos em comparação com às shams. A inoculação intraperitoneal causou bacteremia em ambos os grupos, e as fêmeas OVX apresentaram um recrutamento pulmonar tardio de macrófagos. Além disso, as fêmeas OVX apresentaram maior expressão gênica de IL-1β, TNF-α e IL-6. A maior expressão de IL-6 em comparação às fêmeas sham foi observada mesmo na ausência da infecção. No modelo in vitro foi realizado o isolamento de macrófagos peritoneais (2 x 105 ), de camundongos fêmeas shams (n=3) e OVX (n=3) e machos (n=3), induzidos por tioglicolato e que foram inoculados com S. aureus por 6 horas. Os macrófagos obtidos das fêmeas OVX e dos machos foram previamente tratados por 24 horas com 17β-estradiol (E2) (10-7 M). Os macrófagos foram coletados e destinados para avaliação da expressão gênica relativa de TNF-α, IL-1β, IL-6, IL8 e TLR2. Os resultados mostraram que o tratamento com E2 diminuiu a expressão gênica das citocinas, com exceção de IL-8, em que os MPMs de machos apresentaram um aumento da expressão. Ainda, E2 diminui a expressão gênica do receptor TLR2. No modelo in vitro de hPMs, foram selecionados seis homens e seis mulheres e os hPMs foram isolados a partir de amostras do sangue periférico dos voluntários. Nas mulheres, o sangue foi coletado tanto no período menstrual quanto no período fértil. Após 24h em estufa de CO2, os hPMs foram inoculados por S. aureus por 6 horas. Após esse período, o sobrenadante foi coletado para análise de citocinas por Luminex e os hPMs removidos para análise de 84 genes envolvidos na resposta do hospedeiro a infecções bacterianas por RT-PCR array. Observou-se que, em comparação aos hPMs masculinos, os hPMs masculinos tratados com E2 produziram menos TNF-α, IL-1 e IL-6 e mais IL-23, IL-27 e GM-CSF, e os hPMs de mulheres no período fértil produziram menos TNF-α, IL-1 e produziram mais IL-10, IL-12, IL-23 e IL-27. Em comparação aos hPMs de mulheres no período menstrual, os hPMs de mulheres no período fértil produziram mais IL-12. hPMs masculinos tratados com E2 e hPMs de mulheres no período fértil expressaram menos TRL2 que hPMs masculinos. De acordo a análise da expressão gênica foi possível inferir que o E2 inibiu a via do NFκB. Com isso, conclui-se que o estrógeno atua como um imunoprotetor por modular uma ação anti-inflamatória na resposta imunológica induzida por S. aureus.

Investigar a influência dos parâmetros: intensidade e frequência semanal durante 8 semanas de exercício físico aeróbico, sobre as adaptações da defesa antioxidante e alterações funcionais e estruturais nos rins de camundongos em um modelo de Injúria Renal Aguda induzida pela cisplatina. Foram utilizados 40 camundongos Swiss machos com quatro meses de idade (16 semanas) que foram randomicamente distribuídos em cinco grupos experimentais (n = 8/grupo): 1.Sedentário, 2. (BI_3X) Treinado em baixa intensidade 3 vezes por semana, 3. (AI_3X) Treinado em alta intensidade 3 vezes por semana, 3. (BI_5X) Treinado em baixa intensidade 5 vezes por semana e (AI_5X) Treinado em alta intensidade 5 vezes por semana. Praticaram exercício físico, nado forçado, por 8 semanas e ao término do período de treinamento, foi administrado antineoplásico Cisplatina em todos os grupos experimentais para indução da Injúria Renal Aguda. Após 96 horas da administração os animais foram eutanasiados e os rins, músculos e tecidos adiposos viscerais retirados para posterior análise. Avaliou-se parâmetros de composição corporal, estrutura e função renal, marcadores de peroxidação lipídica e atividade de enzimas antioxidantes, bem como a expressão de genes envolvidos nas vias de balanço redox, inflamatória e apoptóticas. Os resultados obtidos revelaram que a frequência semanal de 3 vezes por semana promoveu melhores resultados com relação a melhora da estrutura renal, do balanço redox e dos processos apoptóticos. Observou-se que o grupo treinado em frequência 3 vezes por semana, independente da intensidade, apresentou maior massa de tecido adiposo marrom quando comparado aos demais grupos experimentais. Estruturalmente houve melhores resultados relacionados a essa mesma frequência com menor porcentagem de túbulos necróticos o que pode ter refletido numa melhora funcional com menor concentração sérica de ureia. Não houve diferença significativa na concentração sérica de creatinina entre os grupos experimentais. A peroxidação lipídica foi maior no grupo sedentário quando comparados aos grupos exercitados, independentemente da frequência e intensidade. Entretanto a atividade da catalase foi maior em todos os grupos exercitados em comparação ao grupo sedentário. O grupo treinado BI_3X apresentou
maior atividade da GPx e menor expressão gênica do NFkB e Caspase-3. Não houve diferenças significativas na expressão gênica do Nrf2 em nenhum dos grupos experimentais. Nossos dados demonstram que a frequência semanal de treinamento foi o parâmetro de maior influência sobre o balanço redox e apoptose e inflamação, na injúria renal aguda induzida pela cisplatina. O resultados indicam que o aumento da capacidade antioxidante no tecido renal atenuam o processo inflamatório e vias de sinalização de morte celular, eventos estes que constituem a fisiopatologia da injúria
renal aguda induzida pela cisplatina.