Banca de DEFESA: DANIELBA ALMEIDA DA SILVA

Uma banca de DEFESA de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : DANIELBA ALMEIDA DA SILVA
DATA : 05/07/2019
HORA: 08:00
LOCAL: IMS/CAT - UFBA
TÍTULO:
PALAVRAS-CHAVES:

Tempol, fumaça de cigarro, Nrf2, inflamação aguda, estresse redox.

PÁGINAS: 100
RESUMO:

A fumaça de cigarro é uma mistura complexa composta por mais de 6000 substâncias químicas diferentes. No pulmão, esses componentes podem direta ou indiretamente desencadear inflamação e estresse redox, característicos de algumas doenças pulmonares, incluindo a Doença Pulmonar Obstrutiva Crônica. Tempol (4-hidroxi-2,2,6,6-tetrametil-1-piperidiniloxil) e outros nitróxidos cíclicos reduzem a injúria tecidual associada à inflamação por mecanismos ainda pouco compreendidos. Na literatura não há relato sobre os efeitos do tempol sobre a lesão pulmonar causada pela fumaça de cigarro bem como seu envolvimento na ativação da via do Nrf2. Nesse contexto, este estudo objetivou avaliar o efeito do tempol sobre a inflamação e estresse redox induzidos pela exposição aguda à fumaça de cigarro in vitro e in vivo. Camundongos C57BL/6 machos (n=32) foram divididos em 4 grupos (n=8, cada): 1) controle exposto ao ar ambiente (GC), 2) animais expostos à fumaça do cigarro por 5 dias (GFC),  camundongos tratados 3) preventivamente ou 4) terapeuticamente com tempol (50 mg/kg/dia) e expostos à fumaça do cigarro por 5 dias (TP50+FC e TT50+FC, respectivamente). Os animais foram eutanaziados após 24 h da última exposição à fumaça de cigarro, e o lavado broncoalveolar e pulmões foram coletados para as análises posteriores. O número de leucócitos totais e neutrófilos bem como concentração e atividade da mieloperoxidase aumentaram no trato respiratório e no parênquima pulmonar dos camundongos expostos à fumaça de cigarro. Como consequência, houve aumento da peroxidação de lipídeos, e nitração e carbonilação de proteínas do pulmão. A administração de tempol antes ou durante à exposição à fumaça de cigarro inibiu entre 60-80% todos os parâmetros acima. Tempol também reduziu a expressão das citocinas inflamatórias IL-6, IL-1β e IL-17 para níveis basais e de TNF-α em aproximadamente 50%. Por outro lado, as transcrições de IL-10, TGF-β, e marcadores de ativação da via do Nrf2, hemeoxigenase 1 (HO-1) e GPx2, aumentaram significativamente nos camundongos tratados preventivamente e terapeuticamente com o nitróxido, o que refletiu diretamente na maior atividade da glutationa peroxidase no homogenato do pulmão. Em seguida, os efeitos do tempol foram avaliados sobre o estado redox intracelular, atividade da óxido nítrico sintase e expressão da HO-1 em macrófagos murinos RAW 264.7. Quando as células RAW 264.7 foram pré-incubadas com tempol (25, 50 e 100 µM) por 24 h e estimuladas com extrato da fumaça do cigarro, a oxidação intracelular da diclorofluoresceína foi reduzida de maneira concentração dependente, embora as concentrações de nitrito e nitrato, marcadores indiretos da atividade da  óxido nítrico sintase, não se alteraram. Nas células tratadas com tempol (50 e 100 µM) por 24 h os níveis de HO-1 aumentaram de acordo com SDS-PAGE/Western Blotting. Coletivamente, esses dados indicam que tempol protege células e tecidos contra o dano oxidativo e inflamação na exposição à fumaça de cigarro provavelmente através da ativação da via do Nrf2.

MEMBROS DA BANCA:
Interno - 1112111 - AMELIA CRISTINA MENDES DE MAGALHAES GUSMAO
Externo à Instituição - FLÁVIA VIANA SANTA CECÍLIA
Presidente - 011.632.625-52 - RAPHAEL FERREIRA QUEIROZ - USP