Banca de DEFESA: RENATA OLIVEIRA DE SOUZA

Uma banca de DEFESA de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : RENATA OLIVEIRA DE SOUZA
DATA : 29/11/2021
HORA: 09:00
LOCAL: IGM Sala Virtual 5
TÍTULO:

O CILIO PRIMÁRIO EM CARCINOMA ESCAMOCELULAR ORAL: PARTICIPAÇÃO NA REGULAÇÃO DA SINALIZAÇÃO HEDGEHOG E PROLIFERAÇÃO CELULAR

PALAVRAS-CHAVES:

Neoplasias bucais, Proteínas hedgehog, Cílio primário

PÁGINAS: 62
RESUMO:

INTRODUÇÃO: O carcinoma escamocelular oral (CECO) é o subtipo tumoral que mais acomete os tecidos bucais. A via Hedgehog (HH) é uma importante cascata no desenvolvimento embrionário, que também está associada ao desenvolvimento tumoral, inclusive do CECO. A via HH ocorre, de maneira canônica, no Cílio primário (CP), estrutura que funciona como um sensor, responsável por abrigar diversas vias de sinalização. Uma alteração da função do CP pode culminar em diversos problemas, inclusive neoplasias. HIPÓTESE: Há perda do CP em CECO, o que favorece a manutenção da proliferação celular e desregulação da via HH. OBJETIVO: Estudar o processo de ciliogênese e a presença do cílio primário em tecidos e linhagens celulares de CECO, bem como a relação entre CP, moléculas HH e proliferação celular deste tipo tumoral. MATERIAL E MÉTODOS: Foram utilizadas linhagens celulares tumorais (CT), não metastática (CAL27) e metastática (HSC3), linhagem celular não tumoral (HGK, controle) e 22 amostras de tumores humanos (TH). As linhagens tumorais foram cultivadas em meio DMEM completo suplementados com 10% de Soro Bovino Fetal, 1% de antibióticos e 8% de hidrocortisona; a linhagem HGK foi cultivada em meio Keratinocyte SFM. As células foram analisadas nos tempos 0h e, para CT, também nos tempos 6, 12, 24 e 48h em privação de soro (sincronização em G0). qPCR foi realizado no tempo 0h (CT e HGK) e nos tempos 6, 12 e 24h (CT), como também para as amostras de TH para análise da expressão gênica da via HH (PTCH1, SMO, GLI1 e SHH), CP (KIF3A, IFT88, AURKA e BORA) e proliferação (Ciclina D1). Para caracterização das proteínas do CP (α-Tubulina acetilada), via HH (SMO e GLI1) e proliferação (Ki-67 e profilina), foram realizados os ensaios de Western Blot (WB) e Imunofluorescência (IF) nas CT (tempos 0, 24 e 48h) e HGK (tempo 0h), assim como Imuno-histoquímica nos TH. A análise estatística foi realizada utilizando o teste ANOVA (p<0,05). RESULTADOS: Genes de montagem e desmontagem apresentaram níveis de expressão abaixo ou similar nas CT quando comparadas à HGK; Não houve diferença estatisticamente significante entre componentes de montagem e desmontagem do CP, proliferação celular e moléculas HH. SHH não foi encontrado nas linhagens estudadas. CP, ativação da via HH (GLI1 nuclear), SMO nuclear e citoplasmático, e proliferação celular (Ki-67 nuclear) foi encontrado nas CT. CONCLUSÕES: O CP está presente em células metastáticas e não-metastáticas de CECO, bem como em tumores humanos. Nestas células e tumores, GLI1 e SMO nucleares foram descritos independente da presença do CP, mas também em células que exibem esta organela. Em conjunto, esses resultados indicam que há ativação da via HH, canônica e não-canônica, em CECO. Ainda, a proliferação celular ocorreu de forma independente do CP nas linhagens celulares

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - 3539352 - CLARISSA ARAUJO GURGEL ROCHA
Interno - 3348245 - DANIEL ABENSUR ATHANAZIO
Externo à Instituição - DANIEL PEREIRA BEZERRA
Externo ao Programa - 1227468 - JEAN NUNES DOS SANTOS
Externo à Instituição - THIAGO DE ALMEIDA PEREIRA