A Laguncularia racemosa L. pertence à família Combretaceae que está presente do norte ao sudoeste do Brasil. Essa espécie faz parte da vegetação dos manguezais e ocorre em áreas com diferentes constituições, tanto em solos arenosos quanto argilosos, sendo utilizada para fitorremediação, avaliação de impactos ambientais e na medicina tradicional como agente de tratamento para algumas doenças. Entretanto, existem poucos estudos etnofarmacológicos e de identificação dos metabólitos responsáveis por suas propriedades biológicas e farmacológicas. Neste contexto, foi utilizada uma abordagem multidisciplinar e integrada para determinar o potencial medicinal quanto a atividade antioxidante, antimicrobiana, toxicológica e antitumoral de extratos de Laguncularia racemosa L. do Litoral Norte da Bahia. A coleta de amostras foi realizada no manguezal do rio Pojuca, Mata de São João, Bahia. Extratos brutos da folha foram preparados por maceração utilizando como solvente o acetato de etila PA, diclorometano e o etanol a 50%. Para a identificação preliminar dos grupos químicos presentes nos extratos foi realizada a triagem fitoquímica. O método de captura do radical livre 2,2-difenil-1-picril-hidrazil (DPPH) foi utilizado para a determinação da atividade antioxidante, aliado a determinação de fenóis totais pelo método de Folin Ciocalteufolin. Para verificar a atividade antimicrobiana foi utilizada a técnica de microdiluição sucessiva em caldo, com cepas ATCC das bactérias gram-positivas Staphylococcus aureus e Bacillus subtilis, bactérias gram-negativas (Escherichia coli e Pseudomonas aeruginosa) como também os fungos Candida albicans e Candida glabrata. O ensaio de toxicidade foi realizado utilizando Artemia salina. Linhagens de glioblastoma de rato (C6) e humano (GL-15)) foram utilizadas para a avaliação da atividade antitumoral citotóxica com a análise morfológica, viabilidade celular, ciclo celular e mecanismo de morte celular. Saponinas, catequinas, taninos condensados, catequinas, flavanóis, triterpenos tetracíclicos livres, taninos hidrossolúveis foram identificados nos extratos. Os extratos apresentaram efeitos nas bactérias utilizadas e não apresentaram efeitos nas cepas de fungos. Os extratos foram tóxicos para cistos de A. salina a partir da concentração de 50μg.mL^-1. O efeito antitumoral foi visualizado a partir da concentração 25μg.mL^-1 onde houve uma redução da densidade celular e alterações morfológicas. Foram identificados 38 metabolitos secundários nos extratos por meio de cromatografia gasosa (GC-MS), de diferentes grupos químicos e alguns destes podem ser responsáveis pelas propriedades das folhas de L. racemosa, que mostrou ser efetiva em relação a atividade antioxidante, antimicrobiana e antitumoral.

O câncer colorretal (CCR) é o terceiro tipo mais comum de câncer, afetando o intestino grosso
e o reto, sendo causado pelo acúmulo de alterações genéticas e epigenéticas. A desregulação
das vias de sinalização celular, como a PI3K, mTOR, ERK/MAPK, TNF-α e TGF-β, contribui
para o desenvolvimento do CCR. A Euphorbia tirucalli, planta conhecida como "aveloz",
contém flavonoides como kaempferol, isoquercetina e quercetina, com atividades antitumorais.
Uma tabela com 63 proteínas importantes na via de sinalização do CCR foi elaborada,
selecionando cinco proteínas-alvo. Foi realizado o modelo de alinhamento flexível de
flavonoides, resultando na seleção do modelo 4, posteriormente a verificação de pontos
farmacofóricos e construção da estrutura única, denominada Flavo1. A molécula Flavo1 foi
otimizada para melhorar sua eficácia terapêutica, levando ao desenvolvimento da Flavo2. O
volume do Flavo2 é de 378,867 unidades e sua densidade é de 1,04. Ele possui 8,0 aceptores e
6,0 doadores de ligações de hidrogênio, dentro dos limites aceitáveis. O Flavo2 apresenta um
QED médio de 0,67 para compostos atrativos, 0,49 para não atrativos e 0,34 para não atrativos
altamente complexos. Sua permeabilidade Caco-2 prevista é expressa como -5,301 log cm/s,
cerca de 0,151 abaixo do valor considerado bom (>-5,15 log cm/s). O Flavo2 obteve a
permeabilidade Caco-2 abaixo do limite considerado bom e apresentou estabilidade e baixa
probabilidade de depuração hepática, mostrando-se como um inibidor da aromatase, podendo

afetar o equilíbrio hormonal. Para a validação de complexos, foi necessário realizar o re-
docking, exceto do TGF-β, que não estava acoplada com um ligante. A interação entre o Flavo2

e a mTOR resultou em uma energia de ligação de -8,74, envolvendo 12 ligantes no sítio de ATP
da mTOR. O Flavo2 mostrou uma interação próxima ao medicamento PI-103, com uma energia
de ligação de -8,78. Com a PI3K, o Flavo2 apresentou uma energia de ligação de -7,89, com
interação significativa com o resíduo crucial. A interação com a ERK2 resultou em uma energia
de ligação de -7,64, enquanto com ulixertinibe foi de -7,65. A ancoragem com TGFβR1
apresentou uma forte interação, com uma energia de ligação de -9,80, enquanto com
Galunisertib foi ligeiramente superior, em cerca de 0,15. Com o TNF-α, o Flavo2 teve uma
energia de ligação de -7,69, enquanto com SPD304 foi de -7,60, inferior ao Flavo2. Ao
comparar o composto Flavo2 com um fármaco sintético, observou-se que a energia de ligação
do Flavo2 foi superior em proteínas como PI3K e TNF-α. Entretanto, não foram observadas
diferenças significativas em relação às outras proteínas estudadas. É importante ressaltar que
são necessários testes complementares para validar esses resultados e aprimorar as propriedades
farmacocinéticas do Flavo2. Essas etapas são cruciais para o desenvolvimento de novos
medicamentos eficazes e seguros no tratamento do câncer colorretal.

A Doença de Parkinson (DP) é um problema de saúde pública que afeta muitos indivíduosno mundo,inclusivenoBrasil.Trata-sedeumadoençaneurodegenerativa de lenta progressão que acomete principalmente a população idosa. Apesar das pesquisas científicas teremavançado no intuito de procurar tratamentos efetivos para esta patologia, aindanão há uma terapia capaz de curar ou inibir a progressão da enfermidade. Acomunidadecientífica vemprospectandocompostosneuroprotetores,queinibam disfunções e morte em células envolvidas na patogênese da DP, dentreestes,épossívelcitaro flavonoide rutina,quevemapresentandopotencial neuroprotor contra a excitotoxicidade glutamatérgica e citotoxicidadeinduzidapor6-hidroxidopamina. No entanto, a falta de esclarecimentos sobre a etiologia da enfermidade dificulta os avanços na descoberta de novos fármacos para o tratamento da DP. Uma importante alteração que precede os sintomas motores clássicos da DP  é o distúrbio  na motilidade gastrointestinal, associado à alterações no sistema nervoso entérico, que também apresenta etiologia desconhecida. Modelos de estudo in vitro e in vivo têm revelado que muitas alteraçõescelulares e moleculares presentes em pacientes com a doença apresentam relação com a toxicidade do aminocromo,um composto derivado da dopamina e precursor da neuromelanina, presente em neurônios dopaminérgicos remanescentes.No entanto, ainda não há relato que o mesmo é capaz de induzir alterações na função entérica. Neste sentido, o objetivo geral deste projeto foi avaliar o efeito da rutina em ratos Wistar machos com danos  induzidos por aminocromo em termos de:1- níveis de expressão de marcador de neurônio dopaminérgico (tirosina hidroxilase) na área tegmental ventral (VTA) e substância nigra pars compacta (SNpc) e, 2- tempo de trânsito gastrointestinal.Para tanto, os animais foram randomizados em quatro grupos, sendo umgrupocontrole (CTR),aminocromo (AMI),rutina(RUT) eaminocromo + rutina (AMI+RUT).Arutinafoi administrada por gavagem, desde o primeiro até o vigésimo primeirodia após a estereotaxia. O peso vivo dos animais foi avaliado do dia da cirurgia estereotáxica até o momento da perfusão. O tempo de trânsito intestinal foi avaliado pelo teste vermelho de carmim, visando analisar as alterações funcionais induzidas pelos tratamentos. Como resultado, a rutina promoveu uma redução no tempo de trânsio intestinal em compração com o grupo controle. O aminocromo também reduziu a expressão de tirosina hidroxilase (TH+) no lado ipsilateral da SNpc, que foi prevenida pelo tratamento com rutina. Por outro lado, não foi abservada alteração na expressão de TH+ no VTA de animais tratados com aminocromo e/ou rutina.A rutina promoveu redução no peso dos animais tratados, apresentando um papel modulatório na regulação ponderal. Assim, estudos são necessários objetivando avaliar os mecanismos bioquímicos incitados para tal modulação, que se faz importante para pesquisas posteriores  usando modelos pré-clínicos da DP.

INTRODUÇÃO: A lesão medular é um grave dano ao sistema nervoso central associado a altas taxas de morbimortalidade, dependência física e encargos financeiros. A inflamação é a principal característica da lesão secundária que proporciona uma cascata de eventos celulares e moleculares que aumentam a área da lesão, agravando os déficits neurológicos e a recuperação tecidual. A literatura apresenta diferentes modelos de estudos no sistema nervoso central nos quais a apigenina tem demonstrado efeitos benéficos. No entanto, há poucas pesquisas sobre o papel neuroprotetor da apigenina na lesão medular, e, além disso, a baixa solubilidade desse flavonoide em água pode ser um fator limitante para suas atividades biológicas. As ciclodextrinas são oligossacarídeos cíclicos cuja estrutura química possibilita a incorporação de substâncias lipofílicas em sua cavidade, conferindo a essas moléculas maior estabilidade e biodisponibilidade. OBJETIVO: Avaliar o efeito anti-inflamatório e neuroprotetor do flavonoide apigenina e de conjugados de apigenina com β-ciclodextrinas em modelo in vitro de neuroinflamação em células da medula espinhal. MATERIAIS E MÉTODOS: Neste trabalho foram utilizadas β-ciclodextrina (β-CD) e outros três derivados. A citotoxicidade da apigenina (API) e dos conjugados de apigenina com β-ciclodextrinas (API-cd’s) foi avaliada pelo ensaio MTT em células PC-12 e células da medula espinhal em uma série de concentrações (0,1-100μM) por 24h. Após sua caracterização, a cultura primária da medula espinhal foi submetida ao dano inflamatório por LPS, e, posteriormente, tratada com apigenina e os melhores conjugados de apigenina. A investigação de alterações em marcadores associados à neuroinflamação foi feita por imunofluorescência. Realizou-se análise da produção de óxido nítrico com os sobrenadantes dos grupos experimentais. A análise da morfologia celular foi realizada por microscopia de contraste de fase, coloração de Rosenfeld e imunofluorescência. A migração celular foi avaliada pelo ensaio de ranhura e imunofluorescência. RESULTADOS E DISCUSSÃO: A API e API-cd’s não apresentaram toxicidade em células PC-12 nas concentrações testadas. Observou-se que três conjugados aumentaram a viabilidade das células PC-12, principalmente na concentração de 10μM. A API e API-cd’s não apresentaram citotoxicidade em cultura primária da medula espinhal nas concentrações testadas. A cultura primária da medula espinhal de ratos neonatos apresenta diversidade morfológica de astrócitos, microglia e neurônios, além de agrupamentos de crescimento celular. As células da medula espinhal foram submetidas ao dano inflamatório por LPS a cinco μg/ml durante 12 horas. A API e API-cd 52 diminuíram a expressão de células IBA-1 e CD-68-positivas após o dano induzido por LPS. Duas API-cd’s reduziram de forma significativa os níveis de óxido nítrico. Duas API-cd’s reduziram de forma significativa o número de células S100β-positivas. CONCLUSÕES: A apigenina e os conjugados de apigenina parecem proteger as células da medula espinhal em modelo in vitro de neuroinflamação.

INTRODUÇÃO: A lesão medular é um grave dano ao sistema nervoso centralassociado a altas taxas de morbimortalidade, dependência física e encargosfinanceiros. A inflamação é a principal característica da lesão secundária queproporciona uma cascata de eventos celulares e moleculares que aumentam a áreada lesão, agravando os déficits neurológicos e a recuperação tecidual. A literaturaapresenta diferentes modelos de estudos no sistema nervoso central nos quais aapigenina tem demonstrado efeitos benéficos. No entanto, há poucas pesquisas sobreo papel neuroprotetor da apigenina na lesão medular, e, além disso, a baixasolubilidade desse flavonoide em água pode ser um fator limitante para suasatividades biológicas. As ciclodextrinas são oligossacarídeos cíclicos cuja estruturaquímica possibilita a incorporação de substâncias lipofílicas em sua cavidade,conferindo a essas moléculas maior estabilidade e biodisponibilidade. OBJETIVO:Avaliar o efeito anti-inflamatório e neuroprotetor do flavonoide apigenina e deconjugados de apigenina com β-ciclodextrinas em modelo in vitro de neuroinflamaçãoem células da medula espinhal. MATERIAIS E MÉTODOS: Neste trabalho foramutilizadas β-ciclodextrina (β-CD) e outros três derivados. A citotoxicidade da apigenina(API) e dos conjugados de apigenina com β-ciclodextrinas (API-cd’s) foi avaliada peloensaio MTT em células PC-12 e células da medula espinhal em uma série deconcentrações (0,1-100μM) por 24h. Após sua caracterização, a cultura primária damedula espinhal foi submetida ao dano inflamatório por LPS, e, posteriormente,tratada com apigenina e os melhores conjugados de apigenina. A investigação dealterações em marcadores associados à neuroinflamação foi feita porimunofluorescência. Realizou-se análise da produção de óxido nítrico com ossobrenadantes dos grupos experimentais. A análise da morfologia celular foi realizadapor microscopia de contraste de fase, coloração de Rosenfeld e imunofluorescência.A migração celular foi avaliada pelo ensaio de ranhura e imunofluorescência.RESULTADOS E DISCUSSÃO: A API e API-cd’s não apresentaram toxicidade emcélulas PC-12 nas concentrações testadas. Observou-se que três conjugadosaumentaram a viabilidade das células PC-12, principalmente na concentração de10μM. A API e API-cd’s não apresentaram citotoxicidade em cultura primária damedula espinhal nas concentrações testadas. A cultura primária da medula espinhalde ratos neonatos apresenta diversidade morfológica de astrócitos, microglia eneurônios, além de agrupamentos de crescimento celular. As células da medulaespinhal foram submetidas ao dano inflamatório por LPS a cinco μg/ml durante 12horas. A API e API-cd 52 diminuíram a expressão de células IBA-1 e CD-68-positivasapós o dano induzido por LPS. Duas API-cd’s reduziram de forma significativa osníveis de óxido nítrico. Duas API-cd’s reduziram de forma significativa o número decélulas S100β-positivas. CONCLUSÕES: A apigenina e os conjugados de apigeninaparecem proteger as células da medula espinhal em modelo in vitro deneuroinflamação.

Para avaliar o vigor das sementes, é possível realizar o envelhecimento acelerado (EA), que consiste em submeter as sementes a alta temperatura e umidade. Além disso, esse teste permite avaliar o comportamento das sementes a nível fisiológico, bioquímico e molecular. Objetivou-se nesse estudo avaliar o comportamento de sementes das cultivares BRS 188 Paraguaçu e BRS 149 Nordestina de Ricinus communis L. antes e após serem submetidas ao EA quanto perfil metabolômico, transcriptômico, enzimático e fisiológico. Foram realizadas as seguintes análises: caracterização inicial das sementes, padronização do EA, grau de umidade das sementes, teste de germinação, determinação da condutividade elétrica e pH do exsudato, teste de tetrazólio, peroxidação lipídica (níveis de malonaldeído – MDA), determinação das atividades das enzimas antioxidantes (superóxido dismutase – SOD, catalase – CAT, ascorbato peroxidase – APX, monodehidroascorbato redutase – MDHAR, dehidroascorbato redutase – DHAR, glutationa redutase – GR, glutationa peroxidase – GPX e glutationa S-transferase – GST). Realizou-se a avaliação de metabólitos primários e secundários por metabolômica, e a produção dos transcritos através do teste de RNA-seq para as sementes de BRS 188 Paraguaçu. Nas sementes BRS 188 Paraguaçu após o EA, ocorreu perda de vigor, aumento da condutividade elétrica, alteração na produção de metabólitos primários (galactinol, mio-inossitol, melibiose, ácido glioxílico, sorbitol, inositol, xilose, sacarose e ribitol) e secundários das classes dos terpenos, compostos fenólicos e alcaloides, e maior expressão de genes, principalmente do metabolismo energético. Em resposta a EA, o aumento da concentração de MDA e da atividade de APX e CAT só foi significativo na semente inteira, enquanto a SOD e a DHAR foram enzimas que apresentaram aumento significativo da atividade na semente inteira e no embrião. A alteração de atividade de GST e GPX foi significativa apenas em amostras dos embriões. Já a cultivar BRS 149 Nordestina, apresentou após o EA redução significativa na viabilidade, com danos de membrana e aumento da peroxidação lipídica. O aumento da atividade de SOD, APX e DHAR foram significativos nas sementes inteiras e no embrião, enquanto a atividade da CAT teve aumento na semente inteira. MDHAR, GR e GPX, aumentou significativamente apenas no embrião. Ao analisar os mecanismos fisiológico, bioquímico e molecular das sementes após o EA, MDA, SOD e DHAR, e o aumento de eletrólitos no exsudado são biomarcadores bioquímicos para a avaliação da qualidade das sementes, assim como, os genes importantes para o metabolismo energético são biomarcadores adequados para avaliação de qualidade de sementes desta espécie.

As infecções emergentes por bactérias multirresistentes a antibióticos são uma grande preocupação para saúde pública, pois trazem risco do surgimento de surtos hospitalares, principalmente em pacientes imunodeprimidos. As bactérias nãodiftéricas do gênero Corynebacterium são microrganismos Gram-positivos que podem estar presentes na microbiota humana normal, mas isolados dessas espécies apresentando o fenótipo de multirresistência a antibióticos têm sido recentemente identificados em diversos casos de infecções no mundo inteiro. Á partir disso, surge a necessidade de entender de forma mais profunda os fatores genéticos associados à virulência e resistência a antibióticos dessas espécies. Esse trabalho de tese baseiase na hipótese de que a análise genômica comparativa de vários isolados de espécies não-diftéricas do gênero Corynebacterium permitirá melhor entendimento sobre os mecanismos genéticos envolvidos com a transição dessas espécies para o fenótipo patogênico em humanos, além de entendimento sobre os mecanismos envolvidos com a rápida aquisição de resistência múltipla a antimicrobianos. Realizamos o sequenciamento genômico completo de 11 isolados de relevância clínica: 3 da espécie Corynebacterium striatum isolados no Brasil; 8 isolados da espécie Corynebacterium amycolatum, sendo 6 obtidos na Espanha e 2 na Tunísia. Além disso, obtivemos 24 genomas de C. striatum e 18 de C. amycolatum depositados no NCBI para integrar nosso conjunto de análises. Desenvolvemos uma sequência de análises que inicia com a identificação filogenômica por ANIb no JSpecies, para garantir a análise de genomas com identificação taxonômica com acurácia, análise pan-genômica com o BPGA, uma ferramenta com pipeline que utiliza o USEARCH para realizar clusters dos genes, além da anotação funcional COG do pan-genoma. Aplicamos nossos genomas no PATRIC para predição de genes de resistência antimicrobiana (AMR), a partir dos bancos de dados do CARD e NDARO, além disso realizamos predições em outras plataformas web como VFanalyzer para fatores de virulência e IslandViewer4 para ilhas genômicas. Os pan-genomas das duas espécies possuem status aberto, C. striatum apresentou α = 0.852803 com um pan-genoma contendo 3816 famílias de genes (27 genomas) e C. amycolatum α = 0,854905 com seu pan-genoma contendo 3280 famílias de genes (26 genomas). Identificamos no conjunto de genomas analisados de C. striatum 15 genes AMR e 32 fatores de virulência, já em C. amycolatum identificamos 9 genes AMR e uma variedade de 47 fatores de virulência. Analisando as ilhas genômicas preditas, identificamos genes AMR e fatores de virulência contidos nesse contexto genômico nas duas espécies. Essas análises demonstraram a relevância da aquisição de genes AMR e fatores de virulência através de transferência horizontal, e os dados sobre o status do pangenoma corroboram essa característica nessas espécies.

Ricinus communis L., conhecida como mamona e mamoneira é uma espécie cultivada por todo o mundo, e possui grande valor socioeconômico, principalmente devido as mais variadas aplicações do óleo extraído de suas sementes. A temperatura é um importante fator no desenvolvimento vegetal, pois variações desse parâmetro podem levar a significativas mudanças fisiológicas, bioquímicas e moleculares. Nesse contexto, foi avaliado o efeito da temperatura na atividade antioxidante, assim como na resposta fisiológica de sementes embebidas e plântulas de Ricinus communis L. Para tanto, foi determinada a atividade de enzimas antioxidantes (glutationa redutase–GR, glutationa transferase–GST, dehidroascorbato redutase–DHAR, superóxido dismutase– SOD, catalase–CAT e ascorbato peroxidase–APX em sementes e plântulas de R. communis submetidas às temperaturas de 25, 30 e 35 °C durante a germinação e estabelecimento de plântulas. A atividade das enzimas antioxidantes foi diminuída a 25°C enquanto a temperatura de 35°C apesar de tornar a germinação mais rápida, é uma condição de estresse que promove maior quantidade de plântulas deterioradas e deformadas. Conclui-se que a melhor temperatura para a germinação de sementes e cultivo de plântulas de R. communis é 30°C, enquanto 25°C apesar de não promover o estresse oxidativo às sementes e plântulas, retardada a germinação e crescimento. A atividade de enzimas antioxidantes varia de acordo com a parte botânica e atuam em diferentes estádios do desenvolvimento vegetal. A tolerância ao estresse térmico em R. cmmunis está associada a robustez do seu complexo antioxidante, sendo que a SOD foi identificada como potencial biomarcador para avaliar a termotolerância em sementes e a catalase foi identificada como potencial biomarcador para avaliar a termotolerância da parte áerea de plântulas de R. communis.

destaque no âmbito científico devido as suas inúmeras atividades farmacológicas de interesse à saúde humana, incluindo seu potencial neuroprotetor. No contexto das doenças neurodegenerativas, a excitotoxicidade glutamatérgica tem sido apontada como um importante mecanismo de morte neuronal associado a progressão dessas doenças. Portanto, este estudo teve como objetivo investigar a atividade neuroprotetora da rutina para células neurais sob ação citotóxica do glutamato. Para isso, células da linhagem PC12 foram submetidas a diferentes tratamentos: tratamento direto com a rutina (0,5 – 1 μM) e/ou glutamato (10 - 60 mM); tratamento indireto obtido com o uso de meio condicionado da cultura organotípica cerebral de rato Wistar (p7-p9) tratados com a rutina (0,5 μM) e glutamato (60 mM). Em adição, também tratamos cultura primária de neurônios/células gliais mesencefálicas com rutina a 0,5 μM. Passadas 24 h dos tratamentos direto e indireto das células PC12, realizamos as análises de viabilidade celular a partir do Teste de exclusão do Azul de Tripan e Iodeto de Propídio. Além disto, realizamos análises morfológicas após coloração de Rosenfeld para as células PC12 e para a cultura primária de neurônios/células gliais mesencefálicas. Os resultados obtidos com o teste de viabilidade celular demonstraram que a rutina não foi tóxica para as células PC12. O glutamato, por sua vez, induziu efeito tóxico para as células PC12 de maneira concentração-dependente, sendo que a concentração a 60 mM foi capaz de provocar aproximadamente  100% de morte para as células em cultivo. Em relação aos ensaios de neuroproteção direta, demonstrou-se que a rutina não foi capaz de proteger as células PC12 contra a toxicidade do glutamato em altas concentrações (30 e 60 mM) induzindo cerca de 20% e 100% de morte, respectivamente. Por outro lado, o meio condicionado de cultura organotípica tratada com a rutina (0,5 μM) + glutamato (60 mM) induziu baixa toxicidade para células PC12, mais especificamente apenas 8% das células morreram com o tratamento, enquanto que o tratamento direto apresentou 100% de células mortas. Em relação as alterações morfológicas, o tratamento indireto com meio condicionado de tratamento com rutina induziu mudanças características de diferenciação neuronal para aproximadamente 26% das células em cultivo, diferente do tratamento direto com rutina o qual induziu 2.5%. Estas alterações morfológicas relacionadas ao aumento de pontos de ramificações e ao aumento do comprimento de neuritos também foram observadas em células PC12 sob tratamento indireto e cultura primária de neurônios/células gliais mesencefálicas. Estess resultados indicam um efeito neuroprotetor e morfogênico da rutina que podem estar associados à modulação do metabolismo do glutamato pelos astrócitos e/ ou liberação de fatores solúveis neuroprotetores e indutores de diferenciação neural.

INTRODUÇÃO: Lepidium meyenii é uma planta que apresenta diversas propriedades medicinais, no entanto, há poucos estudos que correlacionem os metabólitos e as atividades biológicas testadas na planta sob uma perspectiva metabolômica. OBJETIVO: Caracterizar o perfil metabolômico, bem como avaliar as atividades antioxidante, antimicrobiana e citotóxica de extratos obtidos da planta desidratada e de seus produtos comerciais. MATERIAIS E MÉTODOS: Os extratos foram obtidos a partir da raiz da planta e de seus produtos comerciais por maceração em diferentes solventes orgânicos. A atividade antioxidante foi determinada pelo método do sequestro do radical livre 2,2-difenil-1- picril-hidrazil (DPPH) e os fenóis totais foram quantificados pelo método Folin-Ciocalteu. A atividade antimicrobiana foi avaliada frente a bactérias e leveduras através do método de microdiluição em caldo. A citotoxicidade foi avaliada contra a linhagem de células C6 e astrócitos. O perfil metabolômico foi avaliado por cromatografia líquida de alta performance acoplada à espectrometria de massas (CLAE-EM) e cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas (CG-EM). RESULTADOS E DISCUSSÃO: A atividade antioxidante (IC50) variou de 64,97 μg∙mL-1 para o extrato em acetato de etila da raiz da planta desidratada até 935,61 μg∙mL-1 para o extrato em hexano do produto comercial da planta. Os valores de fenóis totais variaram de 6,83 mg∙EAG∙g-1 para o extrato etanólico a 49,83 mg∙EAG∙g-1 para o extrato acetato de etila, ambos os extratos são dos produtos comerciais. Os extratos etanólicos e em acetato de etila foram os mais ativos e apresentaram maior potencial antioxidante, além disso também apresentaram atividade antimicrobiana contra M. luteus e B. cereus e atividade antitumoral contra células C6, não apresentando citotoxicidade aos astrócitos. Foram identificados setenta e seis metabólitos nos extratos e dentre esses, os terpenos foram os principais metabólitos candidatos responsáveis pelas atividades antioxidante e citotóxica e os ácidos graxos pela atividade antibacteriana. CONCLUSÃO: A abordagem metabolômica e a análise estatística multivariada permitiram correlacionar os resultados das atividades biológicas testadas com o perfil químico dos extratos, sendo possível identificar os principais compostos bioativos da L. meyenii relacionados às atividades antioxidante, antimicrobiana e antitumoral da planta. 

Introdução: O diabetes mellitus (DM) é uma doença crônica decorrente de defeitos na produção, secreção ou sinalização da insulina. Pré-diabetes é um estado sem sintomas onde o indivíduo apresenta níveis de glicemia de jejum entre 100 - 120mg/dl e hemoglobina glicada entre 5,7 e 6,5%. Antes definido como um estado latente, atualmente é definido como um período de risco para nefropatia, neuropatia e destruição das células β-pancreáticas. Neste contexto, torna-se relevante a identificação de marcadores biológicos, tais como microRNA (miRNA), para este estado patológico contribuindo para o diagnóstico precoce. Os miRNA são pequenos RNA que não codificam proteínas, mas são considerados importantes reguladores pós-transcricionais. São apontados como potenciais biomarcadores, uma vez que tem seus níveis de expressão alterados em função do desenvolvimento ou do grau de severidade de diversas doenças como diabetes, câncer e esquizofrenia. No presente estudo, visamos identificar um perfil de expressão de miRNA que pode viabilizar o diagnóstico precoce do pré-diabetes. Resultados: Após o levantamento dos transcriptomas publicamente disponíveis em NCBI GEO dataset, um transcriptoma atendeu aos critérios de inclusão deste estudo. A partir deste, foram identificados trinta e três miRNA com perfil de expressão aumentado no grupo pré-diabético em relação ao controle (FC≥1,5 p-valor≤ 0,05) e dois no grupo diabético (FC≥1,5 p-valor≤ 0,05). A rede de interação gerada pelo programa Cytoscape mostrou os miRNAs selecionados e seus alvos diferencialmente expressos no transcriptoma de validação. Cinco destes miRNA apresentaram maiores valores de centralidade na rede de interação miRNA-mRNA (let-7a, Let-7b, miR-106b, miR-93 e miR-17). Estes miRNA apresentaram maior sensibilidade e especificidade para o pré-diabetes (AUC = 0,794). Conclusão: Os cinco miRNA identificados estão envolvidos em diversas vias intracelulares relacionadas à resistência insulínica e destruição das células β-pancreática e estão diferencialmente modulados no transcriptoma analisado neste estudo, podendo ser apontados como biomarcadores exploratórios promissores para diagnóstico precoce de DM2.

Hábitos alimentares com altos teores de gordura e o estilo de vida sedentário são fatores desencadeantes da obesidade, diabetes tipo 2 (DM2) e insuficiência cardíaca. Células mesenquimais (MSC) surgem como uma ferramenta terapêutica capaz de melhorar o quadro de doenças cardiovasculares, mas também de outras condições degenerativas, devido ao seu efeito regenerativo induzido pela sua ação parácrina. Com base nisso, os fatores secretados no meio condicionado (MC) destas células também são investigados na regeneração tecidual. Assim, este estudo visou avaliar o potencial terapêutico das MSC e do seu MC no tratamento das complicações cardíacas em modelo experimental de obesidade e diabetes induzidas por dieta com alto teor de gordura (HFD). Avaliações bioquímicas, murinométricas e funcionais cardíacas foram realizadas nos períodos: pré-indução da obesidade, pós-indução e pós-tratamento. Após 36 semanas de uso de dieta HFD, esta foi substituída pela dieta padrão e seguida pelo tratamento: MSC, MC e DMEM (veículo). A disfunção metabólica foi avaliada através de parâmetros bioquímicos e índice de massa corpórea. A função cardíaca foi avaliada por eletrocardiografia, ecocardiografia e teste ergométrico. Mecanismos moleculares de ação da tersapia foram investigados utilizando qRT-PCR em tecido cardíaco e a presença de fibrose por análise histopatológica do tecido cardíaco. A caracterização do MC foi feita por protein array revelou a presença de 19 proteínas incluindo citocinas e fatores de crescimento. Os camundongos alimentados com HFD apresentaram arritmias cardíacas, expressão alterada de genes cardíacos e fibrose do miocárdio, refletindo na redução da capacidade de atividade física. A administração de MSC ou MC reverteu as arritmias e recuperou a capacidade de realizar exercício físico. Na primeira etapa deste estudo, observou-se a melhora funcional cardíaca em consonância com a normalização da expressão dos genes GATA4, conexina 43 e COL1A1 nos corações de camundongos tratados com MSC ou MC. Por outro lado, a expressão dos genes troponina I, adiponectina, TGFβ, PPARγ, IGF-1, SOCS3, MMP9 e TIMP1 normalizaram após o tratamento com MSC, mas não com o MC. Além disso, a administração de MSC ou MC reduziu o percentual de área com fibrose. A fim de elucidar a significativa melhora alcançada pelas MSC, na segunda etapa deste estudo, aprofundou-se a investigação acerca dos mecanismos moleculares envolvidos neste efeito terapêutico. Foi investigada a expressão de genes relacionados ao remodelamento tecidual (SPARC e CTGF), à apoptose (SMAD7 e PDCD4), à inflamação (CCl2 e CHI3I3), bem como, à sobrevivência e proliferação celular (PTEN e STAT3) por qRT-PCR. Elevados níveis da expressão gênica do SMAD7, PDCD4, SPARC, CTGF, CCL2, STAT3 e PTEN foram detectados apenas no grupo tratado com MSC, enquanto que no CHI3I3 e no NPPA a expressão gênica estava reduzida tanto nos camundongos tratados com MSC quanto nos tratados com DMEM. Os resultados sugerem que as MSC e o MC possuem um efeito terapêutico sobre as alterações cardíacas decorrentes da obesidade e DM2, sendo os fatores relacionados ao desenvolvimento da fibrose, apoptose e à sobrevivência celular modulados, demonstrando a relevância dos fatores secretados pelas MSC reforçando sua ação parácrina.

INTRODUÇÃO: O mecanismo dos tratamentos secundários, como a utilização de antioxidantes e de interferon (IFN) tipo 1, para a patologia associada ao Vírus Linfotrópico de Células T Humanas do tipo 1 (HTLV-1), Mielopatia Associada ao HTLV-1/Paraparesia Espástica Tropical (HAM/TSP), ainda não é completamente elucidado, mas baseia-se na proteção contra as Espécies Reativas de Oxigênio (ERO). A enzima Superóxido Dismutase do tipo 1 (SOD1) catalisa a dismutação dos radicais superóxido e é importante para a sobrevivência do HTLV-1 no meio intracelular. Mecanismos inibitórios dessa enzima, como através do dietilditiocarbamato (DETC), poderia aumentar a concentração intracelular de superóxido, desencadeando estresse oxidativo e induzindo a morte celular por apoptose. Dessa forma, a regulação dos radicais superóxido em linfócitos infectados, através da atividade antioxidante de SOD1, poderia ser um alvo terapêutico para a Leucemia/Linfoma de Células T do Adulto (ATLL), outra patologia também associada ao HTLV-1. OBJETIVO: Investigar a enzima antioxidante SOD1 como um potencial alvo terapêutico para ATLL; e seu inibidor, DETC, como uma terapia pro-oxidante promissora para essa patologia. MATERIAL E MÉTODOS: O banco de dados Gene Expression Omnibus (GEO) foi utilizado para a busca por conjuntos de dados de expressão gênica associados às formas clínicas da ATLL (indolente, crônica, linfomatosa e aguda). A metanálise dos dados foi realizada utilizando o software Ingenuity Pathway Analysis (IPA). A concentração plasmática de SOD1 em indivíduos infectados sintomáticos (ATLL e HAM/TSP), portadores assintomáticos e indivíduos saudáveis não infectados foi avaliada por ensaio de imunoabsorção enzimática ELISA Cu/Zn-SOD. Linhagens de linfócitos T, MT2 e MT4, foram utilizadas nos ensaios in vitro para avaliação da concentração citoplasmática basal de SOD1, por ELISA Cu/Zn-SOD; e para avaliação da inibição de SOD1 por DETC. A capacidade apoptótica do DETC e a validação da sua ação, pelo uso do antioxidante N-acetilcisteína (NAC) foram avaliadas por citometria de fluxo e quantificada por coloração com Hoechst 33432. RESULTADOS E DISCUSSÃO: Nas formas clínicas crônica e aguda da ATLL, observamos que o gene NFE2L2, relacionado à regulação da resposta antioxidante, está sendo diferencialmente expresso, sob regulação positiva, e que a via clássica de proliferação de linfócitos, está ativada. A dosagem plasmática de SOD1 em doadores saudáveis (28.3, 15.6 – 37.75 ng/mL,  n= 20), portadores assintomáticos (193.6, 170.2–327.4 ng/mL,  n =19), pacientes HAM/TSP (38,1, 10,6 – 59,25 ng/mL, n = 14) e pacientes ATLL (270.6, 141.8 – 456.9 ng/mL, n=25) demonstrou que a concentração de SOD1 é significativamente menor (p<0,0001) em pacientes HAM/TSP, em comparação aos portadores assintomáticos e pacientes ATLL, o que pode explicar o sucesso terapêutico de antioxidantes, como a vitamina C para esta forma clínica;  significativamente maior (p<0,0001) em portadores assintomáticos, em comparação aos pacientes HAM/TSP e doadores saudáveis, o que também poderia  sugerir SOD1 como um marcador de prognóstico para ATLL; que está significativamente  maior (p<0,0001) em pacientes ATLL, quando comparada a de pacientes HAM/TSP e a de doadores saudáveis, o que pode representar um alvo terapêutico promissor para o tratamento dessa patologia. Foi possível demonstrar também perda gradativa da viabilidade, dos linfócitos MT2 e MT4, com o aumento da concentração de DETC; e maior sensibilidade de MT4 (IC50=11.92µM), a esse fármaco quando comparado com MT2 (IC50= 26.45µM). Determinamos também, o ápice de resposta positiva ao tratamento com DETC em concentração superior em linfócitos MT2 (50 µM) comparado aos linfócitos MT4 (10 µM). A utilização do antioxidante NAC  para a validação da inibição de SOD1 via DETC, mostrou-se mais proeminente em MT2, nos quais foi possível reverter a ação do DETC até 500μM, mantendo metade da viabilidade celular até 2000μΜ, do que em linfócitos MT4, nos quais reverte a ação oxidante do DETC até 10μM. Tais resultados são corroborados pelo fato de os linfócitos MT2 possuírem uma concentração basal de SOD1 (6.73, 4.47–10.43 ng/mL) superior à de linfócitos MT4 (3.15, 2.78–3.5 ng/mL). CONCLUSÃO: SOD1 poderia ser sugerida como um potencial alvo terapêutico para ATLL, assim como a utilização do DETC como uma terapia pro-oxidante promissora nesta patologia.                                                                     

As plantas medicinais sempre foram usadas para o tratamento de doenças. De modo a avaliar o perfil metabólico e as propriedades antioxidante, antimicrobiana e tóxica de plantas usadas por comunidades tradicionais da região Nordeste do Brasil, cinco plantas medicinais (Abarema cochliacarpos, Euphorbia tirucalli L., Alpinia zerumbet, Miconia albicans e Protium heptaphyllum) foram selecionadas com base na revisão de literatura e no uso dessas plantas por essas comunidades, bem como suas indicações terapêuticas. Folhas, caules e casca das plantas foram coletados na Reserva de Sapiranga, Mata de São João, no Litoral Norte da Bahia, secas a temperatura ambiente e moídas até a obtenção de pó fino. Os extratos brutos foram obtidos por maceração em etanol. A atividade antioxidante foi determinada pelo ensaio de eliminação do radical 2,2-difenil-1-picril-hidrazila. Os fenólicos totais foram quantificados pelo método de Folin-Ciocalteau. A atividade antimicrobiana foi avaliada como concentração inibitória mínima (CIM) usando o ensaio de microdiluição, em placas de 96 poços contra bactérias Gram-positivas - Bacillus subtilis (Bs), Staphylococcus aureus (Sa), Streptococcus mutans (Sm)e Micrococcus luteus (Ml), e Gram-negativas - Escherichia coli (Ec), Pseudomonas aeruginosa (Pa) e Salmonella typhimurium (St). A atividade tóxica foi realizada contra náuplios II de Artemia salina. O perfil metabolômico foi realizado utilizando LC-MS. Quanto a atividade antioxidante, o IC50 para A. zerumbet foi de 15.87μg.mL-1 enquanto para extratos de P. heptaphyllum variou de 4,67 μg.mL-1 (casca) a 22,16 μg.mL-1 (folhas). Para A. cochliacarpos os valores variaram de 3,81 μg.mL-1 (caule) a 5,58 μg.mL-1 (folhas). Para M. albicans variou de 4,63 μg.mL-1 (folhas) a 5,05 μg.mL-1 (caule). E. tirucalli apresentou a menor atividade antioxidante, já que o valor de IC50 foi 317,2 μg.mL-1. Os maiores valores de fenólicos totais foram evidenciados nos extratos de A. cochliacarpos, variando de 70,11 mgEGA.g-1 (folhas) a 100,22 mgEGA.g-1 (casca). O menor valor foi do extrato de E. tirucalli (9,65 mgEGA.g-1). Para A. zerumbet o valor encontrado foi 22,46 mgEGA.g-1 e para P. heptaphyllum os valores variaram de 24,66 mgEGA.g-1 (folha) a 58,22 mgEGA.g-1 (casca). O conteúdo fenólico total dos extratos de Miconia albicans variou de 49,70 a 52,71 mgEGA.g-1para os extratos de folha e casca, respectivamente. O extrato de M. albicans (caule) mostrou atividade antimicrobiana contra Pa, Sa, Bs e Bc. O extrato de A. zerumbet inibiu o crescimento bacteriano na concentraçãode 500 μg.mL-1para Bc e Ec, de 125 μg.mL-1 para Sa. A atividade antibacteriana dos extratos de P. heptaphyllum foi elevada com CIM de 15,62 μg.mL-1 para Ml. O extrato de M. albicans demonstrou uma atividade antimicrobiana conspícua contra as bactérias gram-positivas. Houve também atividade contra a bactéria gram-negativa Pa. Todas as espécies exibiram taxa de letalidade de 100% de Artemia salina na concentração de 1000 μg.mL-1 de extrato. A análise metabolômica dos extratos por HPLC-MS permitiu quantificar diversos metabólitos secundários, tais como flavonoides, compostos fenólicos, fenilpropanóides, terpenos e alcaloides, dentre outros. Conclui-se que estas espécies apresentam grande potencial farmacológico considerando a elevada atividade antioxidante, perfil antimicrobiano e toxicológico correlacionados aos compostos bioativos identificados através do perfil metabolômico.

O HIV foi descoberto em 1983 e já matou de mais de 35 milhões de pessoas em todo o mundo enquanto atualmente 36,9 milhões são portadoras deste vírus. O HIV-1 é a variante mais distribuída no mundo e sua alta taxa de mutação é uma de suas características mais marcantes, resultando no aparecimento de cepas com resistência aos medicamentos antirretrovirais disponíveis, o que torna vital o desenvolvimento de novos medicamentos. Inibidores de fusão são antirretrovirais de terceira linha que impedem a entrada do vírus nas células do hospedeiro e atualmente o Enfuvirtida é o único antirretroviral dessa classe disponível no mercado. Embora existam softwares que determinem a resistência de cepas de HIV-1 à grande maioria dos medicamentos, ainda não existe nenhuma ferramenta específica para os inibidores de fusão. O objetivo deste trabalho foi o desenvolvimento de uma ferramenta de acesso livre para a identificação de mutações associadas com resistência a medicamentos antirretrovirais inibidores de fusão em sequências genômicas do HIV-1. Secundariamente, este trabalho avaliou a prevalência de resistência ao Enfuvirtida nas populações brasileira e mundial e comparou o grau de resistência entre os diferentes genótipos virais. O HIVfird foi desenvolvido utilizando a linguagem de programação PHP e utiliza o programa Kalign para realizar alinhamentos de sequências de DNA. Como referência para realizar o alinhamento com as sequências inseridas pelo usuário, a ferramenta utiliza 30 bases de DNA obtidas a partir da proteína gp41 (aminoácidos 36 a 45) do HIV-1 HXB2. Para avaliar o grau de resistência ao Enfuvirtida nas populações estudadas, todas as sequências de HIV-1 que possuíam a região genômica associada com resistência ao Enfuvirtida foram extraídas do banco de dados dos Los Alamos National Laboratory. O software HIVfird encontra-se hospedado no endereço https://www.hivfird.ics.ufba.br/, totalmente funcional e disponível para uso público. Foram identificadas na literatura 25 substituições de aminoácidos que isoladamente causam algum grau de resistência ao medicamento e 15 combinações de 2 substituições distintas associadas com a diminuição da susceptibilidade ao Enfuvirtida no fragmento compreendido entre os aminoácidos 36 a 45 da sequência proteica da gp41. As posições 44, 43, 36 e 38 foram as que apresentaram a maior frequência de variações associadas com resistência ao medicamento. A partir dessa nova ferramenta, caracterizamos as sequências de DNA presentes no banco de dados de Los Alamos, onde foram encontradas tais substituições em 3,16% nas sequências da população mundial e 4,67% em sequências da população brasileira. A prevalência de resistência ao Enfuvirtida foi identificada para os diferentes subtipos do HIV e verificou-se que a taxa foi significativamente maior para o subtipo B em comparação com o subtipo C (p < 0,0001), o que pode estar relacionado com características econômicas e geográficas. Por fim, espera-se que o uso do HIVfird seja acrescentado no rol de ferramentas de análise de resistência aos antirretrovirais e auxilie profissionais de saúde no planejamento e acompanhamento clínico, bem como a sua utilização para estudos populacionais de resistência ao medicamento pela comunidade científica.

INTRODUÇÃO: O Vírus da Imunodeficiência Humana (HIV) é o agente etiológico da Síndrome da Imunodeficiência Adquirida (AIDS), doença responsável pela morte de 39 milhões pessoas no mundo e ainda sem vacina e sem cura. O vírus apresenta dois tipos, 1 e 2;o tipo 1 é dividido em quatro grupos M, N, O e P e o grupo M é subdivido em 9 subtipos e formas recombinantes. O subtipo C é responsável por mais de 50% das infecções por HIV-1 em todo o mundo, tendo sido isolado primeiramente na Etiópia na década de 80 e encontrado em países populosos da África, Índia, China, Austrália, Europa e América do Sul. Na região sul do Brasil é a forma predominante do HIV-1, tendo sido relatado o aumento de sua circulação nas outras regiões do país. Estudos filogenéticos reconstruíram a história do subtipo C, evidenciando sua inserção no Brasil a partir de uma origem monofilética nessa região, relacionando às linhagens encontradas nos países da região centro-leste do continente africano. No Nordeste, o subtipo C tem sido detectado com uma prevalencia de 4-5% das infecções por HIV. OBJETIVO: Investigar a origem do subtipo C circulante na região Nordeste e avaliar o seu perfil migratório no território brasileiro. MATERIAIS E MÉTODOS: Sequências do gene pol, previamente classificadas como subtipo C, de 48 amostras do Brasil e 36 do mundo foram coletadas de bancos de dados públicos. As sequencias foram isoladas entre 1998 e 2015. Estas foram alinhadas utilizando o MAFFT e Bioedit. O subtipo das amostras foi confirmado através de análises filogenéticas, usando o método de Maximum Likelihood (ML), implementado no IqTree. A análise filodinâmica foi baseou-se no método Bayesiano através das ferramentas do software BEAST versão 1.8.4. RESULTADOS PRELIMINARES: A análise bayesiana indica a ocorrência de pelo menos cinco introduções do subtipo C no Brasil. Quarenta e quatro (91,7%) seqüências brasileiras do subtipo C formaram um clado monofilético composto exclusivamente de seqüências C do Brasil. Esse grupo teria se originado de países na África Oriental, como Burundi, Etiópia e Quênia, por volta de 1983 (1975 a 1992). As outras quatro introduções do subtipo C no Brasil datam de 1985-1990. Três delas foram representadas por seqüências do Sudeste do Brasil e teriam surgido da África do Sul, Tanzânia e Zâmbia. A quinta inserção do subtipo C no Brasil é representada por uma sequência de Roraima e teria se originado na Tanzânia, provavelmente em 1987. Múltiplas introduções da linhagem principal do subtipo C ocorreram entre 1986 e 2005 na região Nordeste e teriam se originado a partir das outras quatro regiões brasileiras. CONCLUSÕES: A epidemia de subtipo C no Brasil resulta de multiplas introduções dessa variante a partir de países do leste e do sul da África. A maioria dos vírus desse subtipo circulante no país deriva de uma única linhagem predominante. Pela primeira vez, uma introdução independente do subtipo C no norte do Brasil foi identificada. Um padrão de migração em curso do vírus para o norte do país é sustentado pelas análises. Os resultados mostram uma ampla difusão do subtipo C nas cinco regiões brasileiras e enfatiza o papel do estado de Goiás na disseminação do vírus para as regiões mais ao norte.