Banca de DEFESA: THIAGO MACÊDO LOPES CORREIA

Uma banca de DEFESA de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : THIAGO MACÊDO LOPES CORREIA
DATA : 08/12/2023
HORA: 09:00
LOCAL: Instituto Multidisciplinar em Saúde-UFBA (remoto)
TÍTULO:

ESTUDOS IN VIVO E IN VITRO DOS EFEITOS DO TREINAMENTO FÍSICO SOBRE ALTERAÇÕES MUSCULARES DECORRENTES DA ASSOCIAÇÃO ENTRE OBESIDADE E ENVELHECIMENTO

PALAVRAS-CHAVES:

 Exercício físico. Envelhecimento. Obesidade. Balanço redox. Inflamação.

PÁGINAS: 121
RESUMO:

Objetivo: Investigar os efeitos do treinamento físico aeróbico realizado terapeuticamente ou ao longo da vida sobre alterações histológicas, no balanço redox, inflamação, e metabolismo no músculo esquelético e  ventrículo cardíaco provocadas pela associação entre envelhecimento e obesidade in vivo e in vitro. 

Métodos: O experimento foi dividido em estudo piloto e estudo principal. O estudo piloto buscou identificar a idade em que as alterações musculares e de performance física se iniciam em resposta ao envelhecimento natural. Dessa forma, 41 ratos Wistar machos com 4 meses de idade foram distribuídos aleatoriamente em 6 grupos definidos pela idade à eutanásia, sendo estes 4 (n = 5), 8 (n = 5), 12 (n = 7), 14 (n = 8), 18 (n = 8) e 20 meses (n = 8). Ao longo do protocolo experimental, os animais foram pesados semanalmente, e a performance física avaliada mensalmente através do teste de corrida máximo em esteira motorizada para ratos. Após a definição da idade na qual o declínio muscular se iniciou (14 meses), foi avaliada a influência do treinamento físico sobre as alterações observadas. Para tal, 32 ratos Wistar machos com 4 meses de idade foram distribuídos aleatoriamente em dois grupos: grupo sedentário (n = 16) e grupo treinado (n = 16). Ao completarem 8 meses de idade, 8 animais de cada grupo foram eutanasiados, formando os grupos jovens sedentário e treinado. Os demais animais seguiram até completarem 14 meses de idade, e constituíram os grupos envelhecidos sedentário e treinado. O treinamento foi realizado em esteira motorizada para ratos, a moderada intensidade, em dias alternados e duração de 1h por sessão. Os animais foram eutanasiados 24h após a última sessão de treinamento. Foram coletadas amostras de sangue, tecidos adiposos e músculos, que foram devidamente mensurados e armazenados em ultra freezer -80 °C, ou fixados. As amostras congeladas foram utilizadas para quantificação dos perfis inflamatório e oxidativo, e as amostras fixadas para estudos histológicos. O estudo principal constitui-se de um estudo in vivo e outro in vitro. O protocolo in vivo foi realizado com 32 ratos Wistar machos que foram distribuídos aleatoriamente em quatro grupos (n = 8/grupo): grupo envelhecido sedentário (ESed), envelhecido sedentário alimentado com dieta hiperlipídica (DHL) (ESed+DHL), envelhecido treinado terapeuticamente e alimentado com DHL (ETT+DHL) e envelhecido treinado ao longo da vida e alimentado com DHL (ETL+DHL). Após 24h da última sessão de treinamento físico, todos os animais foram eutanasiados e em seguida foram coletados o músculo gastrocnêmio e ventrículo cardíaco para estudos histológicos, imuno-histoquímicos, do balanço redox, inflamação e metabolismo. O músculo gastrocnêmio foi utilizado para análise da expressão de mRNA e microRNA por qPCR. Os depósitos de tecidos adiposos abdominais foram coletados e pesados pera determinação da composição corporal. Para os estudos in vitro, foram utilizados macrófagos primários obtidos do exsudato peritoneal de 6 camundongos BALB/c machos com 4 meses de idade, elicitados através da administração de tioglicolato (3% via IP), e mioblastos primários isolados do músculo gastrocnêmio de um rato Wistar macho com 4 meses de idade. As culturas de macrófagos e mioblastos foram expostas ao soro dos animais do estudo in vivo durante 24h. As culturas foram usadas para análise da viabilidade celular por MTT, dosagem de nitritos totais e peróxido de hidrogênio e análise da expressão de genes envolvidos na resposta inflamatória e metabolismo muscular. Todas as variáveis de interesse deste estudo foram submetidas ao teste de normalidade Shapiro-Wilk. As comparações entre grupos do teste piloto foram feitas com o teste ANOVA para medidas repetidas (análise temporal) e ANOVA one-way, seguida pelo pós-teste de Tukey. Para as análises entre grupos jovens e envelhecidos, sedentários e treinados, foi adotado delineamento fatorial (2x2) utilizando o teste ANOVA two-way. As análises dos estudos in vivo e in vitro foram feitas através dos testes T de Student e ANOVA one-way.

Resultados: Os resultados do estudo piloto indicam que o declínio da função muscular se inicia aos 14 meses de idade, evidenciado pela redução da performance física, peso da massa magra e do músculo gastrocnêmio e capacidade antioxidante do músculo. Por outro lado, a rotina de treinamento físico até os 14 meses melhorou
a composição corporal, perfil inflamatório, status redox e protegeu o músculo contra redução da área seccional das fibras. Os resultados do estudo in vivo evidenciaram um desfecho desfavorável em resposta à associação entre envelhecimento e obesidade induzida por dieta sobre os parâmetros musculares e cardíacos morfologia, fibrose, inflamação, estresse oxidativo e metabolismo. Além disso, foi observado no
músculo gastrocnêmio o aumento da expressão do miRNA-21 e genes envolvidos na resposta pró-inflamatória e catabólica, e redução da expressão de genes envolvidos na resposta anti-inflamatória, antioxidante e anabólica. O treinamento físico, em especial o protocolo de treinamento ao longo da vida, atenuou os achados decorrentes da associação entre envelhecimento e obesidade sobre os parâmetros musculares e cardíacos, reduziu a expressão do miR-21 e aumentou a expressão do miR-486. Nos estudos in vitro, os macrófagos e mioblastos expostos ao soro dos animais envelhecidos e obesos apresentaram aumento do perfil pró-inflamatório e catabólico, respectivamente, ao passo que o soro dos animais treinados, especialmente aqueles que realizaram o treinamento ao longo da vida, determinou redução do perfil próinflamatório e catabólico das culturas celulares.

Conclusão: No modelo animal estudado, a associação entre sedentarismo, envelhecimento e obesidade induzida por dieta hiperlipídica determinou prejuízos musculares especialmente nos perfis inflamatório, oxidativo e metabólico. Em contrapartida, a prática regular de exercício físico, especialmente ao longo de toda a vida, atenuou as alterações provocadas pela associação entre envelhecimento e obesidade em todos os parâmetros estudados, in vivo e in vitro. Nossos achados reforçam a superioridade do protocolo de treinamento ao longo da vida como ferramenta eficaz contra os efeitos da idade, mesmo quando associado à hábitos alimentares não saudáveis.

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - 1112111 - AMELIA CRISTINA MENDES DE MAGALHAES GUSMAO
Interno - 1561874 - LUCAS MIRANDA MARQUES
Interno - 2497915 - ROBSON AMARO AUGUSTO DA SILVA
Externo ao Programa - 1670783 - LEANDRO MARTINS DE FREITAS - UFBAExterna à Instituição - ANDREA PIRES DOS SANTOS